流式细胞仪介绍课件

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1、流式细胞仪产品介绍杨海霞德国美天旎生物技术公司(仅供内部培训)主要内容流式细胞仪基本原理MACSQuant流式的性能流式的竞争分析流式细胞仪基本原理流式细胞术（FCM）：就是对在高速流动的鞘液包括下的细胞、粒子进行分析和分选的技术，这种细胞或粒子是经过特异荧光标记的。其特点是测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个细胞，且可进行多参数测量。流式细胞术的概念流式细胞术发展趋势单纯到复杂检测荧光参数定量手动到自动荧光试剂液流检测器光源电子计算机层流鞘液细胞样本鞘液注射口激光流动室流式细胞检测原理细胞可被检测的参数(无探针

2、标记)散射光信号:细胞内在的结构参数细胞大小前向角散射(FSC)细胞内部颗粒性侧向角散射(SSC)ForwardLightDetectorCellSurfaceAreaIncidentLightSource是细胞或细胞上的荧光染料被激光激发后发射出的荧光，不同的荧光染料其发射波长不同。区分阴阳性：通过荧光强度可将同一个细胞群体中的有荧光标记的细胞与无荧光标记的细胞区分开来。区分阳性强弱：也可以将阳性细胞中的高FL的细胞与低FL的细胞区分开来。相对荧光强度（FL）(需探针标记)散点图密度图二维等高图直方图图报告中常

3、见的几种流式细胞图如何看流式图流式细胞术的应用流式细胞术在细胞生物学中的应用染色体核型分析在分子遗传学领域中的应用用于性别的预选择在微生物学中的应用在细胞周期研究中的应用流式细胞术在医学中的应用在免疫学中的应用流式细胞术在肿瘤学上的应用在血液学研究中的应用流式细胞术新的应用流式细胞仪的临床应用HIV免疫分型，CD4绝对计数白血病和淋巴瘤的免疫分型肿瘤的细胞周期和倍体分析网织红细胞计数细胞移植的交叉配型和免疫状态监测干细胞计数残量白血病细胞检查HLA-B27检查血小板功能及相关疾病11临床意义了解在不同情况下体内免疫

4、功能状态辅助临床疾病的诊断探索疾病的发病机理、病程、预后监测、指导临床治疗方案免疫系统疾病免疫缺陷病，AIDS移植病人排斥反应或移植物抗宿主反应的检测肿瘤病人化疗后免疫力检测流式细胞仪的科研应用树突细胞研究干细胞研究癌症病人的多药耐药性细胞周期和细胞凋亡流式细胞术与分子生物学研究细胞系的鉴定细胞内蛋白的分析细胞膜电位测定细胞内钙离子测定流式细胞仪潜在客户医院：血液科，检验科，风湿免疫病科，肿瘤科，细胞治疗科,开展移植（肝肾）的科室。科研院所及大专院校：免疫系或免疫实验室，中心实验室，分子生物学室，肿瘤研究所，血液病

5、研究所。MACSQuant流式细胞仪——细胞分析的里程碑多参数细胞分析MACSQuant光学参数Excitation(nm)OpticalchannelFiltersFluorochromes405nmFL1450/50VioBlue™/PacificBlue™488nmFL2525/50FITCFL3585/40PEFL4655-730PI/7-AAD/PE-Cy5.5/PerCPFL5750(LP)PE-Cy7635nmFL6655-730APCFL7750(LP)APC-Cy7488nmSSC/FSC488/

6、10FSC/SSC三激光紫色(405nm)40mW蓝色(488nm)25mW红色(635nm)20mW9个光学参数FSC/SSC+7个荧光通道MACSQuant光路系统MACSQuant流式细胞仪的创新特性：集成，台式数字化流式细胞仪强大并且直观的软件多参数：3激光，9个参数（FSC,SSC,FL1-7)12寸触摸屏（内置）不同用户登录模式，可用密码进行保护2种不同的模式（针对有丰富经验和无流式经验的人员）分析速度可达10000个细胞/秒,无需计数微珠进行绝对计数不同的流速控制：25/50/100uL/分钟自动化处

7、理样本，自动进样，自动清洁，自动补偿,自动标记矩阵补偿和脱机补偿小巧（60X35X40cm）、低噪、低热。流式细胞仪基本特征细胞富集系统绝对计数，无需微珠自动补偿自动进样自动标记AnewmilestoneincellanalysisMACSQuant™分析仪功能强大、操作简单的多参数细胞分析的理想工具(高端仪器–操作简单–多种自动化选择)MACS®富集系统使用MACS微珠磁性富集细胞细胞被富集后再进行流式细胞术分析预富集的应用：内皮祖细胞检测——频率:每105PBMCs中有1个细胞(如CD34的预富集)肿瘤细胞检测

8、——频率:每107PBMCs中有1个细胞(如EpCAM的预富集)抗原特异性T细胞检测——(如CD154的预富集)成分检测可以只检测富集后组分或者同时检测原始标本、阴性组分和阳性组分MACSQuant流式细胞仪独有特征：高灵敏度地分析稀有细胞每次反应后，自动计算每µL体积中的细胞数——无须计数磁珠，细胞培养后往往需要细胞计数，可以完全替代细胞计数仪CD4绝对计