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时间:2018-09-17
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1、基因工程的主要成果及发展前景1主要内容基因工程概述基因工程的发展简史基因工程的主要成果基因工程的发展前景2基因工程的定义基因工程(geneticengineering)技术是指按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接竞相体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。3①从细胞中分离出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片断③分离大肠杆菌中的质粒④DNA重组⑤用重组质粒转化大肠杆菌⑥培养大肠杆菌克隆大量基因基因工程的基本程序4基因工程的发展简史1972
2、年,以H.Boyer,P.Berg等人为代表的一批美国科学家发展了关于重组DNA技术。并于1972年得到了第一个重组的DNA分子,1973年完成头一个细菌基因的克隆。1973年,美国斯坦福大学和旧金山大学Coken和Boyer两位科学家成功地进行了DNA分子重组试验,揭开了基因工程发展的序幕。1975年,F.Sanger以及A.Maxam和W.Gilbert发明了快速的DNA序列测定技术。1977年,第一个全长5387bp的噬菌体φX174基因组测定完成。1978年,首次实现了通过大肠杆菌生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。1981年,R.D.P
3、almiter和R.L.Brinster成功获得第一个转基因小鼠;A.c.Spradling和G.M.Rubin培育出转基因果蝇。1982年,第一个由基因工程菌生产的药物——胰岛素,在美国和英国获准使用。5基因工程与医药卫生1、基因工程制药我国基因工程制药实施产业化始于上世纪80年代末期,目前基因工程制药主要瞄准一些重大的常见疾病,如艾滋病、癌症、糖尿病、抑郁症、心脏病、老年性痴呆症、中风、骨质疏松症等严重危害人类健康并流行范围较广的病症。8基因工程制药的技术路线基因工程细菌发酵制药基因工程动物细胞培养制药转基因动物生物反应器制药转基因植物生物反应器制药
4、9基因工程与医药卫生基因工程制药的主要流程:获得目的基因(DNA特定片段)→选择基因的合适运载体(另一种DNA分子)组建重组质粒→(将重组DNA引入细菌或动植物细胞并使其增殖)构建工程菌(或细胞)→培养工程菌→(蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、细胞生长因子及单克隆抗体等)产物分离纯化→除菌过滤→半成品检定→成品检定→包装。10基因工程药物(1)重组蛋白质或多肽类药物分类品种代表细胞因子1、集落刺激因子(CSF):GM-CSF、G-CSF2、干细胞因子(SCF)3、肿瘤坏死因子(TNF)4、白细胞介素(IL)5、干扰素(IFN)6、促红细胞生成素(EPO)等
5、蛋白质激素人胰岛素、胰高血糖素、人生长激素降钙素、生长激素溶血栓药物重组葡激酶、抗血栓多肽、重组水蛭素组织血栓溶酶活化蛋白(T-PA)、凝血因子Ⅷ;其他转化生长因子(TGF)、白血病抑制因子(LIF)等、毒素、单抗、受体及粘附分子11基因工程药物(2)核酸类药物包括DNA药物、反义RNA、RNAi药物、核酶等。通过基因工程方法制备的药物通常是与天然蛋白质具有相同结构和活性的重组蛋白或多肽。这类产品多为人工设计,在生理活性、血液中稳定性、耐热性及耐蛋白酶影响等方面性能优于天然型蛋白质。12基因工程与医药卫生在转基因动物制药方面,普遍认为乳腺是最佳“厂址”,
6、因为乳汁不会进入体内循环,不会影响转基因动物本身的新陈代谢,而且从转基因动物乳汁中提取蛋白,产量高、生物活性稳定。英国罗斯林研究所研制成功的转基因羊的乳汁中含有可治疗肺气肿病的抗胰蛋白酶;荷兰的PHP公司用转基因牛生产具有抗菌作用的乳铁蛋白。我国目前已有乳铁蛋白、白蛋白、凝血因子等进入临床试验阶段。在上海奉贤的奉新动物试验场,转基因羊的乳汁中已有了治疗B型血友病的凝血因子Ⅸ,研究工作正在顺利展开。13基因工程与医药卫生2、基因工程在医学临床上的应用主要包括基因诊断和基因治疗。它们为人类及时、有效治疗恶性肿瘤和心血管等重大疾病和防治肝炎、艾滋病等大规模流行
7、病带来希望。14基因诊断应用基因工程诊断疾病即基因诊断,又称DNA诊断,是利用DNA重组技术,直接从DNA水平来检测人类疾病的新的诊断手段。15基因诊断(1)基因诊断遗传疾病,人体基因组的类型早在受精卵开始时就已形成,因此在人体发育的任何时期,只要获得受检者的基因DNA,应用恰当的DNA分析技术,便能鉴定出缺陷的基因。例如α-地中海贫血的Bart’s综合征是由于编码α-珠蛋白的α1和α2基因缺失引起的,应用聚合酶链式反应-等位基因寡核苷酸(PCR-ASO)技术,可以判断是否患有该病;镰刀型细胞贫血症患者珠蛋白Bs基因第6个密码子突变,可以应用限制酶Mst
8、Ⅱ识别法予以诊断;通过限制性片段长度多态(RFLP)的连锁分析,可推测一个家庭成
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