土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案

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1、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数班级姓名[知识梳理]一、筛选菌株1．尿素是一种重要的氮肥，农作物_________（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为，这是因为细菌能合成。2．科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来原理是。〖思考1〗本课题使用的培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是，提供氮源的是，琼脂的作用是。〖思考2〗本课题使用的培养基对微生物（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是。二、统计菌落数目1．在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是。除此之外，也是测定微生物数量的常用方法。2．采用

2、稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于。通过统计，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是。〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是。3．统计的菌落数比活菌的实际数目。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是菌落。因此，统计结果一般用来表示。三、设置对照设置对照的主要目的是。〖思考5〗请设计本实验的对照实验组：。四、实验设计1．实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等

3、。2．根据图示2－7填写以下实验流程：3．土壤微生物主要分布在距地表cm的近中性土壤中，约为细菌。4．分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是-5-，其目的是保证获得的平板。细菌稀释度为，放线菌稀释度为，真菌稀释度为。5．培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在℃培养1～2d，放线菌一般在℃培养5～7d，霉菌一般在℃的温度下培养3～4d。6．在菌落计数时，每隔h统计一次菌落数目。选取时的记录作为结果，以防止因而导致遗漏菌落的数目。7．菌落的特征包括等方面。〖思考6〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？。8．实验过程1）取土

4、样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要。2）应在火焰旁称取土壤g。将称好的土样倒入盛有mL无菌水的中，塞好棉塞。3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在旁进行。4）实验时要对作好标记。注明等。5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当。〖思考7〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被感染，实验后一定要洗手。五、结果分析与评价1．　对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助的方法。2．　在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的将尿素分解成了。氨会使培养基的碱性，PH。因此，我们可以通过检测培养基变化来判断该化学反应是否发生。3．　在以为唯一

5、氮源的培养基中加入指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变，说明该细菌能够。〖思考8〗测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现，通过记数得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取个水样。[跟踪练习]1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找()A．土壤中B．海水中C．热泉中D．冷库中2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、

6、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；-5-3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)()A．2.34×108B．2.34×109C．234D．23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而

7、其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④5.关于土壤取样的叙述错误的是()A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是()①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度

8、A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是()A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布B．测定放线菌的数量，一般选用103、lO