无患子枝干新病害溃疡病病原鉴定

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA44(2)：208—212(2014)无患子枝干新病害一溃疡病病原鉴定王志龙，王胜，谭志文，何月秋(宁波城市职业技术学院，宁波市园林植物开发重点实验室，宁波315502；。浙江万里学院生物与环境学院宁波315100)Pathogenidentificationofsoapberrystemcanker，anewlyfounddiseaseinChinaWANGZhi。long，WangSheng，TANZhi—wen，HEYue—qiu(NingboCityCollegeofVocation

2、alTechnology，keyLabofLandscapePlantUtilityofNingboCity，Ningbo315502，China；CollegeofBiological＆EnvironmentalSciences，ZhejiangWanliUniversity，Ningbo315100，China)Abstract：ThestemcankerdiseaseofSapindusmukorossiwasinvestigatedinNingbo，ZhejiangProvince，China．Afunguswasisolatedfromthed

3、iseasedstemsandtestedforpathogenicityaccordingtoKoch’spostu—lation．ItsrDNAITSsequenceanalysisandmorphologicalcharacteristicsshowedthatitwasFusariumsolani．theanamorphofNectriahaematococca．TheperitheciaofN．haematococcawereaccasionallyfoundinsomeseverelyinfectedstems．Thisisthefirstr

4、eportofthestemcankerdiseaseofSapindusmukorossiinfectedby．haematococcainChina．Keywords：Sapindusmukorossi；stemcanker；pathogenidentification；Fusanumsolani；Nectriahaemato—，)CCa文章编号：0412—0914(2014)02—0208—05无患子(SapindusmukorossiGaerth．)为无患子为有效控制该病害提供理论依据。科无患子属的一种落叶乔木，在东南亚各国、我国1材料与方法淮河

5、以南各省及台湾省均有分布J。无患子种仁富含油脂，含油率高达40．7％，因其树种树型美观，1．1病情调查与症状观察秋季叶色金黄，被广泛应用于城乡园林绿化中。于2009～2012年无患子溃疡病发生期，调查2008年5月，作者在浙江省宁波市进行园林浙江省宁波地区城乡公共绿地和苗圃无患子溃疡植物病虫害种类普查时，在无患子枝干上发现一种病发生情况和发病症状；同时从发病苗圃采集发病新病害。该病发生初期，树干表皮稍肿，病部有汁程度轻的苗木，栽植在宁波城市职业技术学院实习液流出，后导致树皮溃疡腐烂，形成纵向长条状的林场内，自3月底无患子发生新叶开始，直到l2月病斑，并逐

6、渐干燥开裂，露出木质部，严重影响树木上旬落叶止，对溃疡病发生过程进行定期和固定植的正常生长和观赏性，因此得名溃疡病。目前，在株观测。我国缺少对无患子病害的研究。为明确无患子溃1．2病原鉴定疡病的病原，作者对该病害的病原物进行了分离培养、纯化、致病性测定及rDNAITS序列分析，以期1．2．1病原茵分离选择具有典型症状的病株，收稿日期：2012—06—06；修回日期：2013—10—14基金项目：浙江省教育厅高校科研计划项目(Y201017492)；宁波市镇海区科技局计划项目(2069999—53)第一作者：王志龙，男，浙江奉化人，副教授，主要从事园林植物

7、病理学研究；E—mail：wangzhlO1@163．corn。2期王志龙，等：无患子枝干新病害一溃疡病病原鉴定用嫁接刀刮除溃疡部位树皮，从褐色木质部切取大的相关试剂。PCR反应条件如下：94℃2min；约lnlnl厚的组织薄片，经自来水冲洗，切成2×294℃30S，55℃30S，72oC50S，35个循环；72℃mm大小，用0．1％升汞表面消毒3min，无菌水冲7min。将PCR产物经l％琼脂糖凝胶电泳、染色洗3遍，然后将组织块置于马铃薯葡萄糖琼脂和紫外检测。(PDA)培养基上，于28℃恒温培养箱中培养36～DNA—ITS测序与分析将扩增得到的PCR4

8、8h，待组织块周围长出菌丝时，挑取边缘菌丝转产物送交杭州华大基因研究院经纯化后进