松针褐斑病菌毒素诱发紫茎泽兰矿质元素渗漏的研究

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1、n6^6O626卷4期草业科学83—86PRATACULTURALSCIENCE4／2009VoI．26．No．4一～地草护保一～hvOO66^6．—松针褐斑病菌毒素诱发紫茎泽兰矿质元素渗漏的研究张红玉。，何月秋(1．云南农业大学植物病理重点实验室，云南昆明650201I2．西南林学院保护生物学学院云南省高校森林灾害预警与控制重点实验室，云南昆明650224)摘要：采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定了松针褐斑病茵毒素胁迫紫茎泽兰Eupatoriumndenophorum后，叶片及渗漏液中7种矿质元素含量变化。结果表明．毒

2、素胁迫离体叶片和植株后．Ca和K元素含量分别减少65．9、59．5％和32．9％、53．9．其他矿质元素Mg、P、Mn、Zn在叶片中的含量有不同程度增加。渗漏液中Ca、K、Fe元素含量较毒素粗提液中含量增加．以Ca元素含量增加最多(近3O倍)·Mg、P、Mn、Zn元素含量减少。关键词：矿质元素；紫茎泽兰；毒素；电解质中图分类号：$451．1文献标识码：A文章编号：1001—0629(2009)04—0083—04已有的研究表明，植物病原真菌毒素对植物K、Na、Ca、Mg、Fe、Zn等准贮备液(由西南林学院伤害的一个主要方面是破坏细胞膜，诱

3、发细胞内化学实验室提供)，介质是质量分数为5的电解质渗漏[。研究证实，松针褐斑病菌毒素能HNO。。⑤实验仪器：电感耦合等离子体发射光引起紫茎泽兰Eupatoriumadenophorum6种抗谱仪(VISTA—MPXCCDSimultaneousICP—病相关酶活性发生变化，而且该毒素诱发紫茎泽OES)。兰叶片电解质渗漏，渗漏电解质对紫茎泽兰病原1．2试验方法菌(泽兰尾孢Cercosporaeupatorii)生长和孢子1．2．1材料处理①新鲜叶片：采摘紫茎泽兰叶萌发有明显促进作用[3]。矿质元素是植物细胞片若干，用去离子水清洗干净，置于

4、干燥箱中至完电解质的重要组成部分，渗漏电解质中矿质元素全干燥。②毒素胁迫紫茎泽兰离体叶片：采摘紫的种类和含量可能是影响病原微生物侵染和生长茎泽兰叶片若干，置于质量浓度为2．5mg／mL的的重要因素。因此，研究对毒素作用后紫茎泽兰毒素粗提液中处理48h，滤出叶片，用去离子水矿质元素变化进行了测定，为进一步阐明松针褐清洗以除去表面毒素物质，置于干燥箱中至完全斑病菌毒素对紫茎泽兰的伤害机理和利用毒素控干燥。③毒素胁迫紫茎泽兰植株：取一定量的紫制紫茎泽兰的深入研究奠定基础。茎泽兰植株，插于2．5mg／mL毒素粗提液中，481试验材料与方法h后，采

5、下叶片，去离子水清洗干净，剪碎，置于干1．1试验材料①植物材料：试验用紫茎泽兰燥箱中完全干燥。④毒素胁迫后的渗漏液：毒素胁迫紫茎泽兰离体叶片48h后的溶液。⑤毒素叶片采自西南林学院校园。②病原菌：松针褐斑粗提液：质量浓度为2．5mg／mL。病菌Lecanostictaacicola由福建沙县官庄林场严前3个材料为固体材料，需硝化处理，采用干重感病的湿地松Pinuselliottii松针上分离得到，法硝化。向各硝化管中依次加人lmLHNO。、经分离、纯化后，菌种保存于西南林学院微生物室，且于毒素粗提。③毒素粗提物：参照杨斌[。的收稿日期：2

6、008—10—06方法提取获得，用无菌水将毒素粗提物配制成2．5基金项目：国家自然科学基金资助项目(30660106)作者简介t张红玉(1973-)．女(彝族)。云南石屏人，副教授，在mg／mL的溶液。④试验试剂：HNO。、HCI、氢氟读博士生，主要从事植物保护教学与研究工作。Email：zh169827@sina．corn酸、Hz02均为分析纯，超纯水配制。1．0mg／mL通信作者，何月秋84PRATACULTURALSCIENCE(Vo1．26．No．4)1mLHzOz和0．5mL氢氟酸，硝化管置于定氮素含量，重复3次，取平均值，进行

7、矿质元素增减仪硝化炉上，保证密封，硝化炉置于通风橱中，调比例的计算。增减比例一(毒素胁迫后元素含节硝化电压至3OV，硝化5h，去除密封装置，缓量一新鲜叶片内元素含量)／新鲜叶片内元素含缓加热硝化管使溶液蒸发至干，待全干后，向残渣量×1009，5。工作条件组：射频功率为1．0kW，等中缓慢加入2mL高氯酸(白烟冒出)，稍待冷却离子气流量为15．0L／min；辅助气流量为1．5O后向管中加入2mLHNO，缓慢加热溶解残渣，L／min；雾化器压力为200．00kpa，蠕动泵转速15至溶液颜色变为浅黄或无色即可，向管中加入质r／min；读数时间为

8、10．000S，稳定时间为10s。量分数为5的HNO。溶液，过滤，5HNO。定元素的分析线选择：查阅仪器操作软件谱线数据容至5OmL，保存于4℃冰箱中待用。后2个材库，选择谱线间干扰较少、灵敏