蜂胶乙醇提取物对肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响

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1、万方数据第14卷第8期2008年8月中国实验方剂学杂志ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeV01．14．No．8Aug．，2008蜂胶乙醇提取物对肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响郭艳萍H，李光勇2，柳春波1(1．哈尔滨医科大学大庆校区，黑龙江大庆163319；2．哈尔滨医科大学附属第五医院，黑龙江大庆163319)[摘要]目的：探讨蜂胶乙醇提取物(EEP)对小鼠肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响。方法：采用放射性同位索标记物3H．Leu、3H．TdR、3H．UR体内

2、掺入的方法，并以液体闪烁计数仪测定3种标记物的掺入量。结果：EEP可提高肝脏内’H．1_eu、3H—TdR、3H—UR的掺入量，分别比空白对照组提高了34．64％、55．34％、166．27％，其差别有统计学意义。结论：EEP有促进肝脏蛋白质、DNA、RNA合成的作用。[关键词】蜂胶乙醇提取物(EEP)；肝脏；核酸合成；蛋白质合成[中图分类号]R285．5[文献标识码]B[文章编号]1005．9903(2008)08—0066．02核酸是生物遗传的重要物质基础，它能贮存、复制和传递遗传信息，并控制着蛋白质的合成，而蛋白质与一切生命

3、活动密切相关。已有资料证明，伴随着衰老，体内组织核酸、蛋白质也发生变化，其合成一般随年龄增加而降低⋯。因此，测定组织中的蛋白质及核酸的合成能力有助于从分子水平上判断衰老过程，了解衰老的内在变化情况，也是观察药物对衰老过程影响的重要指标。近年来，国内外研究发现蜂胶具有明显的抗癌、调节血糖、增强机体免疫功能、抗菌、抑制病毒等效应∽1。从蜂胶的抗衰老作用研究来看，可提高小鼠肝脏过氧化氢酶与超氧化物歧化酶的活性¨一o。本研究采用同位素标记物体内掺入的方法，研究蜂胶乙醇提取物(EEP)对小鼠肝脏蛋白质与核酸合成代谢的影响。1材料与方法1．1

4、动物昆明种3月龄小鼠，体重(25±2)g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。1．2药品与试剂蜂胶乙醇提取物(EEP)：由黑龙江中医药大学生化教研室提取，经黑龙江中药研究[收稿13期】2008．03．25[基金项目]黑龙江省教育厅资助课题(11521141)[通讯作者】*郭艳萍，Tel：(0459)8153049；E-mail：gyp410@sina．corn·66·所鉴定并测定含量；3H一胸腺嘧啶核苷(3H．TdR)3H一尿嘧啶核苷(3H．UR)3H一亮氨酸(3H．Leu)，均购于中国科学院上海原子核研究所；PPO(2

5、、5-二苯基恶唑)，POPOP(1，4．双．[5一苯基恶唑基．2]．苯)，上海化学试剂一厂产品，闪烁纯；三氯醋酸、无水乙醇、乙醚、甲酸、二氧六环、萘，均为分析纯。1．3仪器液体闪烁计数仪，Beckman公司产品。1．4EEP对3H—Leu掺入小鼠肝脏蛋白质量的影响30只小鼠随机分为3组，每组10只。实验组(EEP组)每日igEEP1次，剂量为300mg·kg一(按黄酮量)，阳性对照组ig维生素E，剂量为50mg·kg一，空白对照组每日ig等量蒸馏水，连续给药25d。实验前12h禁食，各组腹腔注射3H．Leu1．48xlOsbq(4

6、t*ci)／10g，4h后断髓处死小鼠，取出肝脏，用滤纸吸去血液，剪碎，用生理盐水制成50mg·mL一的匀浆。取0．5mL肝匀浆置于10mL试管中，加入10％三氯醋酸2mL，沉淀离心，3500r·min一，10min，弃上清，将沉淀用5％三氯醋酸和1：1醇醚混合物再各洗1次，弃上清，向沉淀中加88％甲酸0．5mL，置于90℃水浴中消化20min，取0．1mL消化液加入含4mL闪烁液(PPO3．0g、POPOP0．5g、萘60g，加二氧六环至500mL，避光保存)的闪烁杯中，次日用液体闪烁计数仪测定样品放射性。1．5EEP对3H．T

7、dR，3H．UR掺入小鼠肝脏DNA、RNA量的影响动物分组、给药等条件均与前相同，实验万方数据第14卷第8期2008年8月中国实验方剂学杂志ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeV01．14．No．8Aug．，2008时分别于腹腔注射3H．TdR，3H．uR1．45×105bq(4gci)／10g，4h后处死小鼠，以后步骤同蛋白质的测定。1．6统计学方法采用SPSS12．0统计软件进行数据处理，多组间比较采用单因素方差分析，各组间两两比较采用q(Student．

8、Newman．Keuls)检验。2结果EEP组3H．Leu，3H．TdR，3H．UR的掺人量均显著高于空白对照组，分别比空白对照组提高了34．64％，55．34％，166．27％；3H．Leu的掺入量显著高于维生素E组(P<0．05)，314．Td