胶原及蛋白多糖含量测定在诊断颈椎间盘突出症中的应用

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1、第第25年3期白求恩医科大学学报Vol.25No.31e9991.N.BETHUNEUNIV.MED.SCI.1999胶原及蛋白多糖含量测定在诊断颈椎间盘突出症中的应用包晓群，杨晓红“朱庆三2姜鸿志2(第三临床学院1神经内科长春1300312骨科)提要目的:研究胶原、蛋白多糖含圣变化在诊断颈彬间盘突出疚中作用，为探讨该病发生机理提供有意义依据。方法:共收集正常颈推问盘36例，颈推问盘突出症突出髓核39例，提取并浏定其胶原、蛋白多糖含黄。结果:突出贬核中胶原含量高于正常组，而蛋白多糖含釜低于正常纽(尸<0.05)。结论:髓核中胶原、蛋白多糖含t变化与颈推间盘突出症的发

2、生相关，可直接反映问盘退变病理过程。美键词颈推间盘越核胶原蛋白多糖中图号R681.52颈椎间盘突出症及退变临床上甚为常见。但迄样品HPR浓度=今确切病因欠清，胶原(Collagen)、蛋白多搪(Pro-胶原百分含量二纂装悬警悉(。为计算常量一7.46)teoglycan,PG)和m作为椎间盘髓核纂质的主要成1.2.2蛋白多糖(PG)含量测定取脱脂髓分，其质和量的变化直接影响间盘软骨的结构强度核，加入木瓜酶消化液置60℃温箱消化。冷却后加为功能稳定。因此，通过对正常与颈间盘突出髓核中300nTCA，离心，取上清。加入100闪咔哇，测胶原和蛋白多糖含量的比较，为颈椎问盘

3、突出症病535nm的吸光值，糖醛酸含量计算:因学诊断提供了有意义的依据，并探讨了该病的病浓度X5X(1/0.OSX100/20)搪醛酸含量(nig/100mg)二1戒)00理生化改变。式中浓度标准曲线对应浓度x样品OD值/标准糖1材料和方法醛酸浓度OD值。5为蒸馏水毫升数，。.05为样品毫1.1测定材料升数,20为样品毫克数。1.1.1正常组头部外伤急死健康男性鲜尸2结果的颈推间盘髓核，年龄23^28岁，急死后4-6h取正常组及髓核突出组胶原,PG含量测定结果材。仔细去除软骨终板，生理盐水漂洗血迹，置见附表。一196C液氮中保存。共36例样本。TableConten

4、tofcollagenandproteoglycaninthe1.1.2髓核突出组因该病就诊，均经MRIcervicalintervertebraldisc(x士s)证实，手术取出39个间盘。其中Ci43例。Cu514GroupCollagen例，C5/618例，Csn4例。其标本用生理盐水漂洗，剔Norrnal319.18士65.77179.03士28.64除软骨后置一196'C液氮中保存。Hm::444.32190.80'86.37士34.11'12方法+P<0.01vsno,mat1.2.1胶原含量测定①髓核脱脂、水解胶3讨论原:将脱脂后的髓核剪碎置50℃烘箱

5、千燥后，取椎问盘组织类属于纤维软骨，其基质的主要成25mg，加6mol/L盐酸2ml，水解10h,⑧测定径脯分为胶原、PG和水，三者之问保持着动态平衡，共氮酸(I-IPR):取待测样品1ml，再加入3.15mol/L同维系着间盘软骨的结构和功能。在所有的哺乳动高氯酸1ml，室温放置5min加入二甲氨基苯甲醛，物脊椎结缔组织中，胶原分子为多型分子结构。主要60℃水浴20min,测定560nm吸光值;标准曲线制以工型和皿型胶原形式存在，并镶嵌在胶原纤维致作:取2.00mg标准HPR溶于50.00ml容量瓶中，密网结构中。这种胶原一PG相互作用，可形成多孔配成储备液，按0

6、,0.05,0.10..........0.40pg/ml稀组合性纤维结构，使健核具有弹性和膨胀性能，产生释成不同浓度与待测样品同步测定吸收光值，作出抗压强度，使正常髓核将应力均匀传递到纤绘环上浓度标准曲线。OaHPR,胶原含量计算:以避免某一部位纤维环承受过多应力负荷而出现髓万方数据包晓群等胶原及蛋白多糖含量侧定在诊断颈椎间盘突出症中的应用核变性，直接影响问盘的结构稳定。酸能够使蛋白多搪核或蛋白多枪链裂解，产生蛋白近些年来，关于间盘软骨生化研究进展较快.多搪降解作用。同时胶原修复作用加强，新胶原形成Muir报道腰椎间盘纤维结构中纤维环外层以I型和代偿活动加强以补充

7、有缺陷的纤维E:和髓核，由胶原为主，健核内以I型胶原为主.并在突出健核中于变性健核中I型胶原存在，致使其吸收震荡和形发现I型胶原存在。李书忠研究发现突出做核中有变能力降低，髓核硬变度增加，弹性丧失，失去均匀I型胶原存在，且胶原含量降低和PG降解增加与传递压力作用，使应力集中到胶原含量低区，引起纤退变关节软骨研究结果相似。朱庆三测定了50例腰维环破裂，髓核突出。因此，我们认为胶原,PG含量椎间盘正常和突出健核胶原、P(}含量，证实了腰椎的变化直接反应了间盘退变的病理过程。测定其含间盘突出健核胶原及PG含量均发生改变。关于颈量的变化为该病的病因学诊断提供了可靠的诊断