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1、附件3:湖南省中医药科研计划项目申请书上册(任务书)课题名称:二甲双胍联合滋肾活血汤对2型糖尿病大鼠CRP、TNF-a的影响的实验研究课题类别:一般项目承担单位:湖南中医药大学课题负责人:颜国富联系手机:13607306636课题申请时间:2011.4.18湖南省中医药管理局填写说明一、请用A4纸打印,页面不敷可另加页。二、所有栏目应如实填写,确无填写内容请填“无”。三、课题研究周期一般设计为二年,最长不超过四年。共同条款签约各方应共同遵守以下条款:一、湖南省中医药管理局为甲方,课题牵头单位为乙方,牵头单位所在市州卫生行政部门或省
2、部直单位为丙方。二、任务执行过程中,乙丙方如需变更任务书内容,应向甲方提出书面说明,经批准后实施。在未接到正式批准前,乙丙方须按原任务书履行,否则,后果由乙丙双方负责。三、本任务书为下达湖南省中医药管理局科技计划项目使用,甲丙方对课题研究有监督权、处置权。乙方因主、客观原因不能按任务书约定内容执行时,甲方有权终止任务,乙方应偿还已投入的全部经费。四、本任务书由签约方各持一份。一、基本情况研究课题名称二甲双胍联合滋肾活血汤对2型糖尿病大鼠CRP、TNF-a的影响的实验研究所属学科生物与医药研究工作总经费3万研究工作起止年月2011.
3、6—2013.6预期成果本课题成果预期达到国内领先水平,尤其在糖尿病专业领域采用中药预防与治疗糖尿病血管并发症方面起到指导性作用。课题组主要成员序号姓名身份证号职称学历所在单位课题中分工签名1颜国富430602196211240016教授本科湖南中医药大学附属岳阳医院全面负责指导课题全过程的设计实施2胡仙430181198008101382主治医师硕士湖南中医药大学附属岳阳医院具体设计实施方案与资料总结3李淑君430103196901231546教授硕士湖南中医药大学附属岳阳医院具体设计实施方案与资料总结4冯佩4306211984
4、10250469医师硕士湖南中医药大学附属岳阳医院实施设计方案5承担单位序号单位名称地址及联系电话1湖南中医药大学附属岳阳医院岳阳市枫桥湖路269号23二、研究目标本研究基于多年临床经验和前期大量基础研究工作,旨在进一步寻求以中西医结合为主,具有良好价效比,适合中国国情的治疗和预防糖尿病血管病变的有效方药。为了进一步探讨该方的作用机制,特设计此实验以深入研究,也为其将来的开发提供科学试验依据。三、主要研究内容和技术方案一.研究内容1.糖尿病血管病变早期阶段病理改变的内在机制研究。2.中药对于糖尿病血管病变的预防和治疗作用效果评估。
5、3.中药对于糖尿病血管病变的预防和治疗作用的机理研究。4.中药预防和治疗糖尿病多系统作用途径研究。5.评价中药和化学药物对于糖尿病血管病变的早期预防和治疗的效果差异。6.中西医结合对于糖尿病血管病变的预防和治疗作用效果评估。7.筛选预防和治疗糖尿病血管病变有确切作用效果的中药二、技术方案、拟采取的研究方法、技术路线和实验方案1.实验对象:清洁级近交系雌性Wister大鼠42只,6月龄,重约150g-200g,由湖南省中医药大学动物实验中心提供。2.实验材料饲料及饲养环境:空白对照组常规饮食,造模组喂给高糖高脂高胆固醇饲料。此饲料由
6、本院实验动物中心自配,其中含10%蔗糖,10%猪油,2.5%胆固醇。每笼10只,自由摄食、饮水。室温18-22°C,空气流通,相对湿度55-70%,12小时光照维持,昼夜循环。药品及试剂:滋肾活血汤为湖南省中医药大学附属岳阳医院中药房一次性购买。二甲双胍:北京嘉德制药有限公司生产。实验试剂NO试剂盒碧云天生物技术研究所INS放免试剂盒北京北方生物技术研究所TNF-α放免试剂盒北京北方生物技术研究所ET放免试剂盒北京北方生物技术研究所SABC免疫组化试剂盒博士德生物工程有限公司浓缩型DAB显色试剂盒博士德生物工程有限公司主要仪器:B
7、IOMIAS图像分析系统:湖南中医药大学基础研究院日本尼泰克ACE919型全自动生化分析仪。法国S-500P半自动生化分析仪。光镜:OLYMPUSBX50日本产电镜:日本JEM-1010(HC)100KV高衬度透射电子显微镜3.实验方法:造模方法:造模组高糖高脂高胆固醇饲料喂养2个月后,禁食12小时,断尾取血,血糖值为16.7mmol/l-25mmol/l者入选。造模成功后,各组恢复常规饮食。分组方法:动物购回,适应性喂养一周后,随机分成空白对照组、模型对照组、中药组、二甲双胍组、中药+二甲双胍组(n=6),除空白对照组外,其他动
8、物均用于造模。造模后,选择符合模型标准的大鼠分别随机分组如下:模型对照组、中药组、二甲双胍组、中药+二甲双胍组,各组数量保持相等,每组均为6只。给药方法:从造模成功后的第一天开始给药,疗程为8周。灌胃情况如下:中药组:每日灌胃量相当于临床成人用药量
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