海洋基因工程复习题

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1、基因工程：通过基因操作来定向改变或修饰生物体或人类自身，并具有明确应用目的的活动称为基因工程。广义基因工程：DNA重组技术的产业化开发与应用。上游技术：外源基因重组、克隆和表达方式的设计与构建。基因操作：对基因进行分离、分析、改造、转移、重组、表达和检测等操作总称。内含子：存在于真核生物基因中无编码意义而被切除的序列。外显子：能够翻译成蛋白质的任一间断的基因片段。粘性末端：识别位点为回文对称结构的序列劲限制酶切割后产生的互补末端。平末端：在回文对称轴上同时切割DNA的两条链所得平整的切口。TaqDNA聚合酶：一种耐热的DNA聚合酶，发现于水生栖热菌内，顾称之TaqDNA聚合酶。质粒：独立于染色

2、体之外的、能自主复制的双链环状脱氧核糖核酸物质。质粒的不相容性：两个质粒在同一宿主中不能工程的现象。转化：借助于人工方法有目的的将异源DNA分子引入另一细胞品系使受体细胞获得新遗传性状的一种手段。克隆载体：用于扩增或保存DNA片段的载体。细菌的溶源化：柯斯质粒载体：人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。插入型载体：通过特定的酶切位点允许外源DNA片段插入的载体。置换型载体：允许外源DNA片段替换非必须DNA片段的载体。人工染色体载体：基于ARS、CEN、TEL是线性染色体保持稳定的功能序列，人们利用这些序列构建载体，重组后的DNA可以线性状态存在，既稳定又提

3、高了插入外源基因的能力且可像天然染色体一样在寄主细胞中稳定复制和遗传。包涵体：外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地集中在一起形成无膜的裸露结构。穿梭载体：能够在两种或多种宿主之间进行复制或表达的载体。整合载体：承担着将某个基因或某些基因插入到染色体中的工作的载体。分子杂交：具有互补序列的两条核酸单链按碱基配对原则形成双链的过程。DNA复性：指变性DNA两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象。Northern印迹杂交：通过RNA/DNA杂交检测RNA的方法。Western杂交印迹法：将电泳分离的非标记蛋白质转移到固相载体上，用特异的抗血清对蛋白质进行鉴定及定量的方法。Ct值：PCR

4、扩增过程中扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。基因组文库：是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。cDNA：指某生物某一发育时期所转录的mRNA全部经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。基因组学：对物种的所有基因进行定位、作图、测序和功能分析以获得生物体全部的基因组序列。序列标签位点STS：STS是一段已知核苷酸序列的DNA片段，是基因组中任何单拷贝的短DNA序列，长度在100～500bp之间，易于识别，仅存在于待研究的染色体或基因组中。表达序列标签(EST)：EST是一个cDNA克隆快速大规模测序后所获得

5、的３’端和５’端部分cDNA随机片段，每个EST长度约200～600bp,代表了一个单拷贝基因的部分cDNA表达序列。基因组工程：以基因组为基础对物种进行大范围修饰和改造，用以产生新的生命力、改造物种和实现人类其他目的的工程。脂质体：一种人造的脂质小泡，外部是脂双层，内部是水腔。诱导型启动子Plac：在某些特定的物理或化学信号刺激下，可大幅度提高基因的转录水平的启动子。藻类基因工程：以海藻为研究对象将某种生物基因通过基因载体或其他手段运送到海藻活细胞中，并使之增殖(克隆)和行使正常功能(表达)，从而创造出藻类新品种的遗传学技术。宏基因组：泛指某一自然环境中全部微生物的基因组群。基因漂流：转基因

6、作物中含有从不相关的物种转入的外源基因，这些外源基因有可能通过花粉风扬或虫媒传授等途径扩散到其他物种。基因操作的主要内容有哪些？基因操作是对基因进行分离、分析、改造、转移、重组、表达和检测等操作的总称。基因操作是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。因此，供体、受体、载体是基因操作的三大基本元件。基因操作的目的是力争外源基因的高效表达，可从哪几方面实现该目的？1、利用载体DNA在受体细胞中独立于染色体DNA而自主复制的特性与载体分子重组，通过载体分子的扩增提高外源基

7、因在受体细胞中的含量，借此提高宏观表达水平。2、筛选、修饰重组基因表达的转录调控元件：启动子、增强子、转录调控序列、操作子、终止子。3、修饰和构建蛋白质生物合成的翻译调控元件：翻译调控序列、密码子。4、外源基因在工程菌中的稳定生产及增殖。限制酶识别的序列特征是什么？1.限制酶识别序列的长度限制酶识别序列的长度一般为4-8bp，最常见的为6个bp。当识别序列为4个和6个碱基时，它们可识别的序列在完全