壳聚糖_丝素蛋白_多壁碳纳米管支架的物理学及生物学性能的研究

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1、分类号：R781.4单位代码：10159密级：公开学号：201521173硕士学位论文（口腔临床医学硕士学术学位）中文题目：壳聚糖/丝素蛋白/多壁碳纳米管支架的物理学及生物学性能研究英文题目：Studyonthephysicalandbiologicalpropertiesofchitosan/silkfibroin/multi-walledcarbonnanotubescaffolds.论文作者：孙进杰指导教师：李琛副教授学科专业：口腔临床医学完成时间：2018年4月中国医科大学硕士学位论文壳聚糖/丝素蛋白/多壁碳纳米管支架的物理学及生物学性能的研究Studyonthephys

2、icalandbiologicalpropertiesofchitosan/silkfibroin/multi-walledcarbonnanotubescaffolds.论文作者：孙进杰指导教师：李琛副教授申请学位：医学硕士培养单位：口腔医学院一级学科：口腔医学二级学科：口腔临床医学研究方向：牙周病学论文起止时间：2018年1月-2018年4月论文完成时间：2018年4月中国医科大学辽宁2018年4月I中国医科大学硕士学位论文摘要目的：重症牙周炎患者一般伴有严重的骨缺损，不仅降低牙齿的咀嚼功能而且影响患者的美观，如何有效的恢复骨缺损是我们面临的一个难题。近年来，骨组织工程的发展

3、为治疗牙槽骨缺损提供了新的思路。本实验利用组织工程的原理，制作壳聚糖/丝素蛋白/多壁碳纳米管(CS/SF/CNTs)骨组织复合支架，评价其物理学性能，并在支架材料上接种骨髓间充质干细胞，评价其生物学性能，希望构建出理想的恢复牙周骨缺损的支架材料。研究方法：通过冷冻干燥技术，制备出稳定的CS/SF/CNTs新型牙周骨组织工程支架；通过对支架的孔隙率,吸水膨胀率的测定和扫描电镜观察，对支架材料物理性能进行测试；分离培养鉴定大鼠骨髓间充质干细胞，将其接种于支架材料上，通过扫描电镜观察及细胞增殖和碱性磷酸酶活性检测，观察细胞和支架材料的相容性以及细胞毒性和成骨能力。结果：1、实验所制备的

4、支架材料疏松多孔，结构稳定，扫描电镜观察支架材料孔隙大致均匀，孔与孔之间连通性较好，多壁碳纳米管（CNTs）在CS/SF/CNTs复合支架中的质量分数从0%增加到9%时，支架的孔隙率从90.31±4.23%下降到81.26±4.33%，吸水膨胀率从138.12±6.75%下降到106.28±5.41%。其中3%碳纳米管含量的复合支架材料孔隙率和吸水膨胀率分别为89.51±5.29%，135.84±4.42%，整体性能最佳，用于后续实验。2、将大鼠骨髓间充质干细胞接种于含有3%碳纳米管的CS/SF/CNTs复合支架材料24h后，扫描电镜观察细胞在支架上生长良好，可见细胞增殖明显，细

5、胞之间联合紧密，支架材料各壁及空隙细胞数量较多。细胞呈扁圆形，周围伸出伪足。3、MTS法检测细胞增殖结果表明细胞在CS/SF/CNTs复合支架材料以及不含碳纳米管的壳聚糖/丝素蛋白（CS/SF）支架上都能良好的生长繁殖，其细胞增殖率显著高于空白对照组（P＜0.05），表明CS/SF/CNTs复合支架材料有良好的生物相容性。4、碱性磷酸酶（ALP）活性检测结果表明CS/SF/CNTs支架对骨髓间充质干细胞分泌碱性磷酸酶有促进作用，与CS/SF支架和空白对照组相比差异具有显著性意义（P＜0.05）。结论：1、将壳聚糖溶液，丝素蛋白溶液，多壁碳纳米管相混合，采用冷冻干燥的方法能够制备出

6、稳定的CS/SF/CNTs复合支架材料。2、含有3%碳纳米管的CS/SF/CNTs复合支架材料具有适合成骨细胞生长的孔径大小和孔隙率，有良III中国医科大学硕士学位论文好的吸水膨胀率，有利于细胞旳生长、增殖，有良好的生物相容性，并且能够促进骨髓间充质干细胞成骨向分化，是潜在的用于恢复牙周骨组织缺损的支架材料。关键词：骨组织工程；壳聚糖；丝素蛋白；碳纳米管；骨髓间充质干细胞IV中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective:Periodontaldiseaseisaninflammatoryanddestructivediseaseinvolvingperiodonta

7、lsupportingtissue.Withthedestructionofperiodontalsupportingtissueandtheabsorptionofbonetissue,toothlossiseventuallycaused.Severeperiodontitispatientsareusuallyaccompaniedbyseriousbonedefects,alveolarbonecanbesignificantlyabsorbedhorizontally,