资源描述：
《骨外科基因治疗ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、骨科基因治疗简述TableofContents1基因治疗概述2骨科基因治疗现状3动物实验研究4临床研究5基因治疗在骨质疏松性骨折中的运用（重点）基因治疗概述基因治疗(genetherapy)是将某种形式的核酸转入患者体细胞内以减轻疾病的过程。就是把由一个或几个基因及其调控序列转移(genetransfer)到靶细胞并发挥遗传物质的作用以治疗疾病。目的基因选择载体的选择基因转移方法的选择靶细胞基因位点的选择步骤：基因治疗概述基因载体病毒导入基因的大小有限制其转基因的效率虽较高有免疫原性运用于人体治
2、疗有较大的危险性非病毒安全性相对高基因不能长期表达基因治疗概述基因治疗目的：(1)替代缺损基因；(2)加强常规基因的功能；(3)在DNA或RNA水平阻断致病基因的作用。基因治疗的根本点是使内源细胞产生特殊蛋白其包含4个关键步骤：转导、转录、翻译、表达。骨科基因治疗现状骨科基因治疗是分子生物学在骨科领域的重要应用，是极有前途的一种治疗方法，但目前仅限于实验室阶段，距离临床大量应用尚有一段距离（仅个别疾病开始了局部基因治疗的初期临床研究）。本小组成员阅读大量有关文献，从动物实验研究与临床研究两方面进
3、行简单介绍，重点叙述基因治疗在骨质疏松性骨折中的运用。动物实验研究一、骨愈合的基因治疗目的基因只需在骨诱导早期数天或数周短期表达以启动骨诱导即可。目前促进骨愈合基因治疗的热点集中在BMP-2、7、9基因在脊柱融合、长骨缺损中的应用。将目的基因导入基质细胞,不仅可以提供目的基因表达产物,自身还可被诱导分化为骨祖细胞以弥补局部骨前体细胞的不足。BMP-2电泳结果经过转导后结果对比二、椎间盘疾病的基因治疗IVD特有的解剖结构以及低氧、低营养、低pH值的生理环境更适合活体直接转基因术的应用。（未来方向）
4、三、肌腱和韧带的基因治疗腺病毒作为载体较为适宜。Hart等将重组了反义核心蛋白聚糖核苷酸的HVJ/脂质体注入兔的内侧副韧带损伤处。实验结果显示基因治疗有助于腱愈合和避免腱粘连动物实验研究四、关节和软骨的基因治疗滑膜覆盖了关节囊的所有内表面,故滑膜内衬细胞是较为理想的靶细胞。Frisbie等将Ad-EqIL-1Ra注入马的OA关节内,术后关节评分显著增高,关节滑液渗出减少,关节病变程度减轻。基因转染治疗骨性关节炎动物实验研究五、脊髓和周围神经损伤的基因治疗由于髓磷脂的抑制作用、神经胶质瘢痕形成和细
5、胞死亡,脊髓损伤后几乎没有自发性的再生。Ad-NGF、Ad-FGF-2注入损伤背根的神经胶质中FGF-2或NGF的表达诱导了明显的局部轴突生长,温度觉基本恢复正常。临床研究目前骨科基因治疗的临床研究仅限于RA的基因治疗。在有效性和安全性试验的基础上,1996年美国开展了第一例基因治疗RA,它不仅是首例基因治疗的骨科疾病,也是首次应用基因治疗非致命性疾病。另有二个临床试验是在关节内转导单纯疱疹病毒携带的胸苷激酶基因,表达产物促使滑膜细胞凋亡,进行“基因滑膜切除术”。基因治疗在骨质疏松性骨折中的运用
6、>40岁人群骨质疏松症男性11.15%女性19.19%低骨量的患病率男性45.18%女性32.14%一、骨质疏松性骨折的愈合能力较差：老年人缺乏间充质干细胞,且功能低下；来自骨质疏松症患者的细胞比正常细胞合成更少的Ⅰ型胶原纤维。二、促进骨质疏松性骨折愈合的必要性：将大大降低由于内固定失败和长期制动而产生的并发症的发生率。骨折愈合中的重要基因产物生长因子大多数实验聚焦在转基因表达骨形成蛋白(BMP)的使用上。BMP-2和BMP-7cDNA具有克服调节屏障的优势而用于临床,最新研究显示BMP-6和B
7、MP-9cDNA是更有效的成骨性因子转录因子LIM矿化蛋白-1(LMP-1),其在啮齿类动物中,低浓度时促进成骨并能引起脊柱融合。其它细胞因子大多数细胞因子的作用在于增加骨形成,从而促进骨折的早期愈合。实验研究显示:给予IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)或一种可溶形式的TNF-1受体能引起去卵巢大鼠或小鼠的骨丢失。基因治疗在骨质疏松性骨折中的运用三、基因治疗骨质疏松性骨折的基因治疗正在探索,目前大多数的研究都处在动物实验阶段,但却展示出诱人的前景,主要采取的方式有两种:一种是直接体内基因转移；另
8、一种是先体外后体内的基因转移方式。直接体内基因转移1、直接体内基因转移体内基因转移包括通过转导局部的细胞将基因转移到特定的解剖部位。技术简单,易于临床应用,而且费用较低;其不足之处是靶向转导困难,转导效率较低目前主要有两种体内转移方式:一种是植入掺在胶原海绵(作为基因活化基质)里的质粒DNA;另一种则直接注射病毒载体。直接体内基因转移包含编码PTH1-34和BMP-4质粒的基因活化基质技术(GAM)能够修复愈合达5mm的大鼠股骨缺损。当这一技术用于狗的临界大小胫骨缺损上,含有PTH1-34cDN
