正文描述:《医药学医学毕业论文 肺栓塞动物实验模型简述》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号:XXXXXXXXX姓名:XXX专业:医药学医学论文题目:肺栓塞动物实验模型简述指导老师:XXX二〇一一年十二月十日【摘要】肺栓塞(pulmonaryembolism,PE)是内源性或外源性栓子阻塞肺动脉引起肺循环障碍综合征,临床的误诊率和死亡率均很高。目前主要进行的是回顾性分析研究,以动物实验研究为主,肺栓塞的动物模型制备方法主要包括体内血栓形成法和体外血栓形成法两种。【关键词】 肺栓塞 疾病动物模型1 前言肺栓塞(pulmonaryembolism,PE)是内源性或外源性栓子阻塞肺动脉引起肺循环障碍的临床和病生理综合征。PE的栓子
2、99%为血栓性质[1]。其病理、病理生理、临床表现与血栓的大小、形状及堵塞肺血管床的部位和范围有关,因而表现出不同的临床类型,即猝死型、急性肺心病型、肺梗塞型和不可解释的呼吸困难型[2]。在全世界范围内,急性血栓性肺栓塞及其原发病深静脉血栓形成的罹患者已达数百万,且发病急、病情重,严重威胁着人类的生命和健康[3]。2 肺栓塞病生理目前对肺栓塞的病理生理学改变已有广泛研究,其变化复杂多变,主要是影响呼吸系统、血流动力学及血管内皮功能,从而产生一系列心肺功能异常及血管内皮功能的改变[4],引发多种临床表现,严重者可危及生命。影响PTE的严重程度主要取决于以下三方面因素
3、:(1)栓子的大小、栓塞的部位和程度多发栓子的递次栓塞间隔和栓子溶解速度等栓塞相关因素。(2)神经-体液因素:栓子表面的血小板活化并脱颗粒,释放各种血管活性物质,如5-羟色胺、血栓素A2、组织胺、血小板活化因子和12-脂氧化酶产物等。同时此后两者又可诱发中性粒细胞释放血小板活化因子和花生四烯酸代谢产物。上述各种介质具有收缩肺血管作用,使肺动脉压力增高和血管通透性改变[5]。近期国内发表的一组动物实验结果显示,PTE(肺动脉血栓栓塞)后有血栓形成,栓塞后病理改变取决于血栓的形成、溶解、机化三者间的作用,内皮素代谢障碍和血栓素A2升高在发病中具有重要作用[6]。(3)
4、基础心肺功能条件也影响PTE的程度。3 肺栓塞动物模型由于其误诊率高,且尸检率低,很难进行较大样本的研究,目前国内对肺栓塞的临床回顾性分析研究并未取得较大进展。所以对其发病的病理生理及治疗基础性研究主要借助于动物实验。动物模型的制备方法可分为两种,即体内血栓形成法和体外血栓形成法。前者在血管内原位形成血栓,包括颈静脉股动脉、股静脉、冠状动脉,血栓形成后通过血流在肺动脉阻塞血管并形成栓塞。体外血栓形成法是在体外制备血凝块,将血凝块注入体内,形成肺栓塞的模型。实验动物包括鼠、兔、犬、猪等[7]。早期国外多选择犬来建立肺栓塞模型,因为犬体积大,操作方便,不足是实验成本高
5、,犬类性凶猛[8-11]。随着分子生物学的发展,近年来多选用大鼠[12-13],但同时也暴露出体积小、操作难的缺点。目前应用较多的为家兔肺栓塞模型,其体形适中且成本低,模型建立便捷。现就动物模型的制备及应用综述如下:3.1家兔肺栓塞模型家兔肺栓塞模型是目前最为成熟和普遍的方法,且已经证明兔的纤溶系统比狗和猪的更接近于人体纤溶系统,所以兔的肺栓塞模型也是最为理想的模型。由于该法是在体外形成血栓注入体内,所以相对于人体在形成肺栓塞时常有高凝状态,凝血机制失衡引起,该模型没有体现出机体的高凝状态,故仍有不足之处。①Nowak法体内血栓形成法是指在外周血管中形成血栓,让栓
6、子通过血液流动到达肺动脉,阻塞肺动脉,形成栓塞,最为成熟的方法为Nowak法,具体方法如下:家兔麻醉后,游离出一侧颈静脉和一侧颈总动脉,动脉插管和静脉插管,其中,动脉插管和静脉插管用三通管相连,三通管另一端与1ml注射器相连,注射器内吸取有0.6ml凝血酶(10NIH凝血酶U/ml),开启动脉插管和注射器之间的通道,使血液流入注射器内1ml,关闭该通道,取下注射器振摇数次,使凝血酶和血液充分混匀,然后将凝血酶处理后的血液再通过三通管注入颈静脉,注意此时一定要夹闭颈静脉10min,待血栓形成后,移去静脉夹,释放栓子,栓子随血液流动到达肺动脉,即可形成肺栓塞模型。由于
7、该法模拟了肺栓塞发病时的血液高凝状态,所以更能较体外血栓形成法准确反映机体状况,但该法形成肺栓塞后的长期观察却鲜有报道,肺栓塞形成后血管的复通率、模型的持久性等问题仍有待于进一步研究探讨。②碘标记法(Lodogen法)国外近年来常用I标记纤维蛋白原后,再把含有125I的纤维蛋白原和凝血酶混合,制成125I标记的血凝块,然后注入动物体内,标记常用Lodogen法[14],具体步骤如下:取Lodogen液,用三氯甲烷溶解,室温下氮气吹干制成反应管,加入纤维蛋白溶液,立即加入Na125I11.1×10Bq,充分振荡混匀,标记反应混合物加至凝胶柱层析脱碘,磷酸缓冲液洗脱。
8、留取标记纤
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