医药学医学毕业论文 006右旋-氨基酸的研究进展

《医药学医学毕业论文 006右旋-氨基酸的研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学医学论文题目：006右旋-氨基酸的研究进展指导老师：XXX二〇一一年十二月十日关键词：右旋-氨基酸分析方法生理学　　摘要　最近发现右旋-氨基酸，特别是右旋-天门冬氨酸和右旋-丝氨酸广泛存在于哺乳动物体内，提示人们关注右旋-氨基酸在哺乳动物生命活动中的意义。本文综述了右旋-氨基酸的分析方法、来源与生理特性。　　关键词　右旋-氨基酸　分析方法　生理学　　一般认为人体和生物蛋白质均由左旋（L）-氨基酸组成，但从50年代始逐渐有人

2、报道一些生物和人体内也有右旋（D）-氨基酸，而且当时认为D-氨基酸与某些疾病或衰老有关［1～4］。但随着科学技术的进步和分析方法的发展，人们不断发现海洋动物、无脊椎动物、脊椎动物、藻类及种子植物等含有多种游离的D-氨基酸，特别是对哺乳动物体内右旋-氨基酸的研究，提示人们应对D-氨基酸在哺乳动物体内的生理意义予以关注。　　1d┐氨基酸的分析方法　　1.1酶法　D-氨基酸氧化酶或D-天门冬氨酸氧化酶，在黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）存在的条件下，将D-氨基酸氧化为α-酮酸并与二硝基联苯肼反应生成腙，然

3、后在445nm测吸光度［5］。空白对照组则加入蒸馏水代替D-氨基酸。此外还有D-氨基酸的定量方法，但并非对各个D-氨基酸定量，一般用氨基酸分析仪分离定量各种氨基酸的L-型和D-型总量，然后将剩下试液中的D-氨基酸在D-氨基酸转氨酶和2-酮酸存在下，生成α-酮酸和氨基正己酸后，将未反应的L-氨基酸再次经氨基酸分析仪定量，两者之差即为D-氨基酸的量［6］。　　1.2气相层析法　该法由于具有分离效能高、分析速度快、样品用量少等特点，因而广泛用于科研和医药卫生、食品领域等。但其不足之处是在缺乏纯样品的情

4、况下定性比较困难。因此色谱和光谱、质谱联用，可以发挥更大的作用。因氨基酸的极性大，挥发性小，故须加入一种最稳定且能定量衍生物的光学活性剂（N-三氟乙酰基正丁酯等），通过硅胶毛细管柱，根据光学活性区分开D-氨基酸与L-氨基酸［7］。利用L-缬氨酸结合型为固体相，被测样品中微量的D-氨基酸在固体相，而比较不稳定的L-型复合体则较早流出，因此可正确定量D-氨基酸。但样品中有6％～10％旋光化。　　1.3效液相色谱法　最近广泛应用的高效液相色谱（HPLC）法具有明显的高性能，但用它来分析自身吸光度低的氨

5、基酸，如机体内微量的右旋-氨基酸是很困难的。因此，可将氨基作为目标，使其与分子吸光系数大的紫外可见光试剂和荧光试剂反应，然后检测其反应结合物。为了检测准确，所用的试剂的光谱纯度必须为100％，且不易使反应物旋光化［8］。　　D┐氨基酸的来源在生命起源之初合成的氨基酸为D-型和L-型。过去认为随着生物的进化，选择性地排除了D-氨基酸，从而使生物体内的蛋白质均由L-氨基酸构成。但最近10年来不断地在哺乳动物体内发现游离D-氨基酸，以下从两方面探讨其来源。　　2.1近年来许多研究证实微生物、大鼠、鸡、

6、鸽子、牛和人体中广泛存在D-氨基酸。最近，Nagata等［9］首次报道一些细菌、古生菌（archaea）及真核微生物的可溶性肽链上有D-氨基酸，用HPLC法分析发现，革兰氏阳性菌中丙氨酸和谷氨酸等的对映体比率为11.7％，枯草杆菌的谷氨酸对映体比率为22.3％；革兰氏阴性菌含有高浓度的D-天门冬氨酸；大鼠体内含有高浓度的D-丝氨酸，大脑皮质、海马及纹状体中分布最多，延髓、小脑和脊髓分布较少［10］。还发现不同年龄的人死后前脑皮质有高浓度的D-丝氨酸和D-天门冬氨酸。Huang等［11］报道，人尿

7、中排出大量的D-丝氨酸，且排出量与年龄无关。成年狗尿中含有大量的D-丙氨酸，未断奶期和断奶期大鼠的D-丝氨酸的含量均很高，且随年龄增加而下降，但D-丙氨酸的含量则与年龄呈正相关。有人用分子生物学方法证实大鼠大脑和肾脏含有D-氨基酸氧化酶［12］。Dunlop等［13］用放射性同位素标记法证实大鼠大脑的D-丝氨酸直接来源于L-丝氨酸的异构体。用电镜和免疫组化方法证实牛肝和肾皮质含有D-天门冬氨酸过氧化物酶［14］。Kera等［15］首次证实鸡和鸽子肾脏也含有大量的D-天门冬氨酸和D-谷氨酸，鸡中这

8、两种物质的含量与雌雄有关，而鸽子中的含量则与雌雄无关。此外，甲壳类、头足类、鸟类的神经组织中D-天门冬氨酸含量也很高。机体内代谢速度缓慢的蛋白质如珐琅质、牙质、脑白质、骨髓磷脂碱性蛋白和晶体核，每年约有0.1％旋光化。Fujii等［16］首先观察了不同年龄的人眼晶体蛋白中天门冬氨酸的异构化，指出在晶体存活早期（11个月）就有氨基酸的异构化，并且随年龄增加异构化也增加。　　2.2　外源性　含有D-氨基酸的食物很多，如发酵食品和经碱、热处理的食品，天然食品如海带、野菜、苹果和梨的细胞质、甲壳类（大虾