二参汤对心肌缺血大鼠能量代谢的影响.doc

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1、二参汤对心肌缺血大鼠能量代谢的影响【摘要】目的:利用垂体后叶素腹腔注射造成大鼠心肌缺血模型,观察二参汤对大鼠心肌缺血的保护作用。方法:将60只Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、二参汤低、中、高剂量组、肠溶阿斯匹林组,观察二参汤对各组大鼠心电图、血清LDH、CK及心肌组织ATP的影响。结果:二参汤可以对抗垂体后叶素腹腔注射造成大鼠心肌缺血损伤,使心肌缺血大鼠的心电图ST段异常升高数减少,能显著降低血清中CK和LDH的释放,保护心肌ATP酶活性。结论:二参汤对大鼠心肌缺血有保护作用,其机制可能与抗自由基与抗脂质过氧化

2、反应有关。【关键词】二参汤;心肌缺血;能量代谢;大鼠  二参汤具有益气活血,通络止痛的功效。经过大量临床观察表明其对缺血性心脏病、心绞痛具有良好的疗效。为进一步阐明其作用机理,验证其疗效,我们观察了该药对垂体后叶素诱发的大鼠心肌缺血损伤的保护作用,为临床应用二参汤治疗心血管疾病提供了理论基础。  1材料与方法  1.1实验动物与药物Wistar大白鼠70只,体重250-300g,8-10周龄,雄性,购自长春开发区实验动物中心。二参汤(黄芪,党参,丹参,川芎,降香,麦冬,五味子,木香,薤白,三七,水蛭,甘草)、垂体后叶素

3、、ATP酶测试盒、LDH测试盒、CK测试盒均购自南京建成生物工程研究所。  1.2实验方法将大鼠随机分为6组,每组10只:正常对照组,用10mL/kg蒸馏水灌胃;模型组,用10mL/kg蒸馏水灌胃;二参汤低、中、高剂量组,用浓度分别为50g/L、200g/L、400g/L的二参汤10mL/kg灌胃;肠溶阿斯匹林组,用浓度为3.33g/L的肠溶阿斯匹林10mL/kg灌胃。连续灌胃14d后,除正常对照组外,其余5组大鼠用垂体后叶素(Pit)20U/kg腹腔注射造成心肌缺血模型。各组在给与垂体后叶素前后均描记心电图。24h后

4、全部大鼠用20%乌拉坦10mL/kg腹腔注射麻醉,进行指标测定。  1.3指标测定(1)麻醉后,将大鼠仰卧位固定,四肢皮下插入针状电极及胸前电极,每只大鼠先做心电图。各组动物均记录正常II导联,测定用垂体后叶素ST段异常偏移总毫伏数(∑ST)、每组出现ST段异常的动物数及ST偏移的平均值,作为判断心肌缺血程度和药物疗效的指标。(2)模型成功后,剖腹,自腹主动脉无菌取血,在4℃条件下3000rpm离心10min,分离血清置于-70℃冰箱待测。(3)模型成功后,大鼠于腹主动脉取血后立即冰面上快速取心肌组织,平行于冠状沟均匀

5、地将心室部分横断成5份,取其2份放入2mL预冷4℃的生理盐水中,用玻璃匀浆器制备脑组织匀浆镜下观察到细胞膜破,取10%匀浆上清加生理盐水,按1:9制成10%匀浆液,3500r/min离心15min,取上清-70℃冻存作相关检测。(4)大鼠处死后,取其余心肌组织进行病理学检查。3  1.4统计学分析所有数据经SAS软件包处理,数据以(x±s)表示,所得数据作方差齐性试验后作配对t检验,P<0.05有统计学意义。  2实验结果  2.1对心肌缺血大鼠的心电图ST段偏移的影响见表1。  表1二参汤对心肌缺血大鼠II导联

6、ST偏移的影响(略)  注:与正常对照组比较△P<0.05;与模型组比较#P<0.05;与模型组比较▲P>0.05  2.2对心肌缺血大鼠血清LDH、CK的影响见表2。  表2二参汤对心肌缺血大鼠血清LDH、CK的影响(略)  注:与正常对照组比较△P<0.05;与模型组比较#P<0.05、##P<0.01;与正常对照组比较▲P>0.05  2.3对心肌缺血大鼠心肌组织ATP的影响见表3。  表3二参汤对心肌缺血大鼠心肌组织ATP的影响(略)  注:与正常对照组比较△P<

7、0.05;与模型组比较#P<0.05、##P<0.01;与正常对照组比较▲P>0.05  3讨论  我们已有实验证明,二参汤具有抗自由基、抑制脂质过氧化反应的作用。在本实验中我们观察到模型组血清LDH、CK活性,与正常组比较具有显著性差异,说明垂体后叶素导致的心肌缺血样损伤而产生的氧自由基使心肌细胞膜脂质过氧化增加。同时观察到心肌中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性降低[1],这说明垂体后叶素导致的心肌损伤使得心肌抗氧化系统清除自由基的能力下降,心肌能量代谢发生障碍[2-3]。而二参汤能明

8、显降低血清中LDH、CK、MDA含量;同时提高Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性,提示二参汤通过减少脂质过氧化而维持细胞膜的完整性。通过本实验,我们观察到二参汤通过抗自由基、抑制脂质过氧化、稳定细胞膜等多种途径对垂体后叶素导致的心肌损伤起到良好的保护作用。【参考文献】  [1]StojanoricT,MrsuljaB

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