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时间:2018-09-04
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1、市售高丽参与中国红参的质量评价作者:张语迟,王淑敏,宋凤瑞,刘志强【摘要】目的:比较市售高丽参与中国红参中人参皂苷的含量,初步作出二者的质量评价。方法:采用比色法对市售高丽参与中国红参进行总皂苷含量测定,采用高效液相色谱法对高丽参与中国红参中主要单体皂苷进行测定比较。结果:中国红参总皂苷和主要的单体皂苷含量均高于韩国高丽参,而且红参中含有高丽参中不存在的单体皂苷Rg3、20S-Rg3。结论:市售中国红参质量高于市售高丽参。【关键词】红参;高丽参;比色法;高效液相色谱法 高丽参为韩国人参用韩国独
2、有的技术加工而成的人参制品,具有色泽鲜艳、柔软美观、具人参特有香气的特点[1]。在市场上高丽参的售价往往是中国红参的几倍甚至十几倍[2]。为考察两者之间的质量差异,我们对两种人参总皂苷和主要单体皂苷进行了分析比较。 1实验部分 1.1仪器与材料 Varian紫外可见分光光度计(美国VARIAN公司澳大利亚分公司);Waters600半制备型高效液相系统,ELSD2000检测器(美国Alltech公司);电子分析天平:SanoriusBSl10S(北京赛多利斯有限公司,一万分之一);KQ25
3、00E型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);醋酸、乙腈为色谱纯,购于Fisher试剂公司;其他试剂为分析纯;水为超纯水(1812MΩ·cm);红参与高丽参对照药材均购于中国药品生物制品检定所。市售红参与高丽参均购于吉林大药房。人参皂苷标准品Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3由吉林大学药学院提供。 1.2实验方法与结果 1.2.1标准曲线的制备精密称取人参皂苷Re标准品10.01mg,定容于10mL容量瓶中,制成每1mL含1.001mg的对照品溶液。分别精密移取
4、对照品溶液30、60、90、120、150μl,分别加入干燥具塞的试管中,水浴挥干溶剂,各加5%香草醛冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL于60℃恒温水浴加热15min,取出,流水冷却2min,加冰醋酸5mL,摇匀,随行空白,于550nm处测定吸光度值。以吸光度值A为纵坐标,浓度c为横坐标,得出标准曲线为:A=0.11693c-0.03604,r=0.9998,样品在0.1-10mg/mL范围内线性关系良好。 1.2.2样品溶液的制备分别取红参、高丽参对照药材和样品粉末2g,分别置于索氏提取
5、器中,用三氯甲烷连续回流3h脱脂,脱脂后药渣置于100mL锥形瓶中,加入水饱和正丁醇30mL,超声提取1h(30℃、500W),滤过,滤液蒸干,残渣以甲醇+4滴吡啶定容于10mL容量瓶中,备用。3 1.2.3样品含量测定取供试品200μl3份,分别置于干燥具塞的试管中,水浴挥干,加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL。60℃水浴加热15min,取出后流水冷却2min,加冰醋酸5mL,摇匀,于550nm处测定吸光度,根据标准曲线计算人参总皂苷含量,结果红参对照药材3.052%,高丽
6、参对照药材2.891%,市售红参2.651%,市售高丽参2.058%。 1.3高效液相色谱法测定高丽参和红参中人参单体皂苷含量 1.3.1高效液相条件美国Waters600LC系统,Alltech2000型ELSD检测器,检测器条件为Temp:110℃;GasFlow:2.1L/min;Gain:1;Impactor:Off。Agilent1100Series自动进样器;CapcellPakC18色谱柱(4.6×250mm,5μm)(迪马),柱温35℃;采用二元线性梯度洗脱:流动相:(A)0
7、.2%冰醋酸水溶液;(B)乙腈。流动相梯度组成:0-2min,A:B为75%:B25%;2-50min,A75%-50%,B25-50%;50-80min,A50%-0%,B50%-100%。流速为0.5mL/min。样品进样量为10μl[4]。色谱图见图1和图2。 图1市售高丽参高效液相色谱图(略) 图2市售红参高效液相色谱图(略) 1:Rg12:Re3:Rf4:Rb15:Rc6:Rb27:Rd8:Ro9:Rg310:20s-Rg3 1.3.2标准曲线的制备分别精密称取人参皂苷Rb11
8、.21mg、Rb21.45mg、Rc1.36mg、Rd 1.13mg、Re 0.94mg、Rf1.03mg、Rg11.08mg、Rg30.98mg,将上述8种标准品用甲醇定溶于2mL容量瓶中,摇匀,待用。分别取上述标准品溶液10、12、14、16、18μl注入色谱仪,以峰面积的自然对数值为纵坐标,进样量为横坐标绘制标准曲线。Re+Rg1:y=1.1489x+12.813,r=0.9994;Rf:y=0.6392x+13.82,r=0.9989;Rb1:y=1.3349x+12.743,r=0.9
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