液相实验室操作要点及注意事项

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1、液相实验室操作要点及注意事项1.液相色谱仪应置于稳定的工作台上,避免震动、阳光直射和气流。环境温度为10-30℃(应恒定),相对湿度25%-75%。电源电压220±20V。应保持仪器放置房间的清洁、卫生,每天打扫房间、擦洗操作台和仪器外壁。2.流动相使用前必须经过0.45µm的滤膜,有机相的流动相必须为色谱纯,水相必须为新鲜制备的纯化水,并规定使用有效期,以防止长菌或长藻类。3.AgilentHPLC色谱仪用于清洗用的10%异丙醇每15天更换一次,WatersHPLC色谱仪用于清洗密封垫和进样针的10%甲醇每15天更换一次。4.色谱柱长时间不用,存放时,柱内

2、应充满溶剂,两端封死(如ACN适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相)。5.对于手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。6.AgilentHPLC色谱仪每3个月或当玻璃滤头发黑时,用30%硝酸浸泡玻璃滤头30min(禁止超声),WatersHPLC色谱仪每3个月用纯化水超声金属滤头30min。7.AgilentHPLC色谱仪使用5ml/min的流速排气时,如果压力大于10bar,更换过滤用白色滤头;WatersHPLC色谱仪应定期(说明)清洗在线过滤器。8.紫外检测器的氘灯有一定的寿命,进样前一小时左右打开即可。实验

3、完成冲洗柱子时即关闭以延长使用时间。每3个月用色谱纯的异丙醇(或甲醇)冲洗检测池。9.仪器如较长时间不用应使高效液相色谱仪处于所有电源开启、检测器紫外灯关闭的待机状态,不能频繁的开启/关闭电源。10.发现泵漏液、紫外灯能量不足或损坏、仪器无法启动等等较严重的情况,应报告室主任,室主任安排进行检查,维修,并做好记录。11.进入计算机上的色谱工作站应设置密码。如工作站上不能设置密码,则应在装有该色谱工作站的计算机上设置密码,防止未经许可授权的人员进入该工作站系统。1.应设置计算机屏幕保护的密码,间隔时间不大于15分钟,防止在操作者离开计算机较长一段时间时,其他人

4、员进入工作站。所有的密码应由室主任做统计并报上级领导备案。2.操作人员应正确运用工作站,不得对计算机系统时间等基础信息进行改动,保证采集到的数据原始真实、完整规范。3.可根据需要选择工作站提供的图谱打印格式打印图谱,但必须保证图谱所有信息的完整性,不得对页眉、页脚的内容进行删减。4.色谱图的图谱号必须保证唯一性;样品命名必须细致详尽。每张图谱上应记录检验人和复核人以及时间。5.电脑中的检验原始图谱每半年至少备份一次,用硬盘或光盘归档保存。所得数据硬盘或光盘由QC按检验记录的管理规定中相关规定进行保存。6.个人实验台面及使用的试剂等都应做好标识,以防混淆,以便

5、偏差的调查。7.数据应在第一时间记录,保证真实可靠。8.氯仿,四氯化碳,甲醇以及苯等高危溶剂,或者盐酸等强刺激性气体使用时候注意排气通风。9.硫酸,硝酸等氧化性酸,注意使用安全,如果不小心滴在身上,应立即使用水清洗,然后用碳酸氢钠液洗涤,不要因为浓度很低而忽视,因为随着水份的蒸发,硫酸的浓度增高,而会使得原来的稀硫酸同样变成浓硫酸。10.所有有机的废液都要放入废液缸,禁止倒入下水道,造成环境污染.所有的高浓度无机废液,包括酸碱以及所有的有毒废液,比如砷试剂都严禁倒入下水道。11.使用量筒、移液管、滴定管移取一定液体,在读数时,应该使视线刻度与液体凹面最低点的

6、切线处于同一平面上。12.C18色谱柱在使用完后,应先用水相(10%甲醇)冲洗较长时间(约1h),再使用有机相(90%甲醇)冲洗30min后密封保存。其他类型的色谱柱应按相应的要求冲洗,保存。13.色谱仪在使用完后,应用大量水相冲洗管路,以防止系统残留的缓冲盐等析出,堵塞管路。14.色谱柱安装时应尽量减少死体积,以免影响分离效果。15.自动进样器的针座应定期拆下清洗,避免影响下一次试验。1.色谱仪应防止流动相抽干。泵需设定压力上限(15-20Mpa)和压力下限(0.5-1Mpa),若不小心抽干应使用过滤脱气后的甲醇冲洗,以排去系统中的气体。2.在切换使用含缓

7、冲盐的流动相时,为防止盐类析出,应先用水相(10%甲醇)过渡。3.流速升高或降低时,应逐步完成。4.容量瓶等应认真清洗,根据使用的样品类型,选择相应的清洗试剂,放置在相应的位置,以免混淆。5.实验室内的电器应定期检查,防止漏电等事故。6.保证电子天平的使用环境符合相应的要求:电子天平工作条件:温度15~25℃,相对湿度<75%,电源电压220±20V。7.本仪器应在正常的照明、室温和湿度条件下使用,防止在高温高湿的条件下使用,避免经常接触腐蚀性气体,否则将影响使用寿命,承放本仪器的基座或工作台应牢固稳定,并基本水平。8.电子天平在每次接通电源后应预热三十分钟

8、后方可开启显示器进行称量。使用前应调节天平水平钮,使

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1、液相实验室操作要点及注意事项1.液相色谱仪应置于稳定的工作台上,避免震动、阳光直射和气流。环境温度为10-30℃(应恒定),相对湿度25%-75%。电源电压220±20V。应保持仪器放置房间的清洁、卫生,每天打扫房间、擦洗操作台和仪器外壁。2.流动相使用前必须经过0.45µm的滤膜,有机相的流动相必须为色谱纯,水相必须为新鲜制备的纯化水,并规定使用有效期,以防止长菌或长藻类。3.AgilentHPLC色谱仪用于清洗用的10%异丙醇每15天更换一次,WatersHPLC色谱仪用于清洗密封垫和进样针的10%甲醇每15天更换一次。4.色谱柱长时间不用,存放时,柱内

2、应充满溶剂,两端封死(如ACN适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相)。5.对于手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。6.AgilentHPLC色谱仪每3个月或当玻璃滤头发黑时,用30%硝酸浸泡玻璃滤头30min(禁止超声),WatersHPLC色谱仪每3个月用纯化水超声金属滤头30min。7.AgilentHPLC色谱仪使用5ml/min的流速排气时,如果压力大于10bar,更换过滤用白色滤头;WatersHPLC色谱仪应定期(说明)清洗在线过滤器。8.紫外检测器的氘灯有一定的寿命,进样前一小时左右打开即可。实验

3、完成冲洗柱子时即关闭以延长使用时间。每3个月用色谱纯的异丙醇(或甲醇)冲洗检测池。9.仪器如较长时间不用应使高效液相色谱仪处于所有电源开启、检测器紫外灯关闭的待机状态,不能频繁的开启/关闭电源。10.发现泵漏液、紫外灯能量不足或损坏、仪器无法启动等等较严重的情况,应报告室主任,室主任安排进行检查,维修,并做好记录。11.进入计算机上的色谱工作站应设置密码。如工作站上不能设置密码,则应在装有该色谱工作站的计算机上设置密码,防止未经许可授权的人员进入该工作站系统。1.应设置计算机屏幕保护的密码,间隔时间不大于15分钟,防止在操作者离开计算机较长一段时间时,其他人

4、员进入工作站。所有的密码应由室主任做统计并报上级领导备案。2.操作人员应正确运用工作站,不得对计算机系统时间等基础信息进行改动,保证采集到的数据原始真实、完整规范。3.可根据需要选择工作站提供的图谱打印格式打印图谱,但必须保证图谱所有信息的完整性,不得对页眉、页脚的内容进行删减。4.色谱图的图谱号必须保证唯一性;样品命名必须细致详尽。每张图谱上应记录检验人和复核人以及时间。5.电脑中的检验原始图谱每半年至少备份一次,用硬盘或光盘归档保存。所得数据硬盘或光盘由QC按检验记录的管理规定中相关规定进行保存。6.个人实验台面及使用的试剂等都应做好标识,以防混淆,以便

5、偏差的调查。7.数据应在第一时间记录,保证真实可靠。8.氯仿,四氯化碳,甲醇以及苯等高危溶剂,或者盐酸等强刺激性气体使用时候注意排气通风。9.硫酸,硝酸等氧化性酸,注意使用安全,如果不小心滴在身上,应立即使用水清洗,然后用碳酸氢钠液洗涤,不要因为浓度很低而忽视,因为随着水份的蒸发,硫酸的浓度增高,而会使得原来的稀硫酸同样变成浓硫酸。10.所有有机的废液都要放入废液缸,禁止倒入下水道,造成环境污染.所有的高浓度无机废液,包括酸碱以及所有的有毒废液,比如砷试剂都严禁倒入下水道。11.使用量筒、移液管、滴定管移取一定液体,在读数时,应该使视线刻度与液体凹面最低点的

6、切线处于同一平面上。12.C18色谱柱在使用完后,应先用水相(10%甲醇)冲洗较长时间(约1h),再使用有机相(90%甲醇)冲洗30min后密封保存。其他类型的色谱柱应按相应的要求冲洗,保存。13.色谱仪在使用完后,应用大量水相冲洗管路,以防止系统残留的缓冲盐等析出,堵塞管路。14.色谱柱安装时应尽量减少死体积,以免影响分离效果。15.自动进样器的针座应定期拆下清洗,避免影响下一次试验。1.色谱仪应防止流动相抽干。泵需设定压力上限(15-20Mpa)和压力下限(0.5-1Mpa),若不小心抽干应使用过滤脱气后的甲醇冲洗,以排去系统中的气体。2.在切换使用含缓

7、冲盐的流动相时,为防止盐类析出,应先用水相(10%甲醇)过渡。3.流速升高或降低时,应逐步完成。4.容量瓶等应认真清洗,根据使用的样品类型,选择相应的清洗试剂,放置在相应的位置,以免混淆。5.实验室内的电器应定期检查,防止漏电等事故。6.保证电子天平的使用环境符合相应的要求:电子天平工作条件:温度15~25℃,相对湿度<75%,电源电压220±20V。7.本仪器应在正常的照明、室温和湿度条件下使用,防止在高温高湿的条件下使用,避免经常接触腐蚀性气体,否则将影响使用寿命,承放本仪器的基座或工作台应牢固稳定,并基本水平。8.电子天平在每次接通电源后应预热三十分钟

8、后方可开启显示器进行称量。使用前应调节天平水平钮,使

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