斜纹夜蛾论文：斜纹夜蛾 caspase rt-pcr 基因 race

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1、斜纹夜蛾论文：斜纹夜蛾Splicaspase-1基因的克隆及分析【中文摘要】细胞凋亡(Apoptosis)是当前生命科学研究的热门领域,在哺乳动物和线虫的凋亡机制方面已取得较大进展,但对于昆虫细胞凋亡的信号途径仍有许多问题有待探究。细胞凋亡的分子机制在生物进化整个过程中高度保守,昆虫细胞凋亡途径与哺乳动物凋亡途径有许多相似之处,也有不相同的地方。在对昆虫模式生物果蝇和哺乳动物细胞凋亡途径的比较研究中发现的不同,对细胞凋亡的发展提出了新的视角。本文主要克隆鳞翅目斜纹夜蛾(Spodopteralitura)Casp

2、ase基因的全长cDNA,以期望能对进一步探索该基因在细胞凋亡中的作用和找到与调控Caspase活性相关的蛋白提供重要线索。本实验从莲纹夜蛾(Spodopteralittoralis)和草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)序列出发,根据其中保守性高的序列设计引物,提取SL-1细胞中的总RNA,并进行逆转录和PCR扩增,首先获得了一条419bp的cDNA片段,并以此序列为基础设计了几组3’-和5’-RACE的基因特异性引物,然后采用SMARTRACE技术克隆了SpodopteralituraCa

3、sp的3’末端和5’末端,通过序列拼接,得到的...【英文摘要】Apoptosisisthecurrenthotareasoflifescienceresearch.ThemechanismofapoptosisinmammalsandC.eleganshasmadegreatprogress.,butfortheinsectcellapoptosissignalingpathwaysarestillmanyissuestobeexploring.Themolecularmechanismofapoptosis

4、intheprocessofbiologicalevolutionishighlyconserved.Therearemanysimilaritiesbetweeninsectcellsapoptosispathwayandthatofmammalian.ThedifferencesintheapoptosispathwaybetweenDrosophilamelanogasterandmammalsarefound,wh...【关键词】斜纹夜蛾CaspaseRT-PCR基因RACE【英文关键词】Spodopt

5、eralituraCaspaseRT-PCRgeneRACE【目录】斜纹夜蛾Splicaspase-1基因的克隆及分析中文摘要4-5Abstract51.前言8-161.1细胞凋亡8-91.1.1细胞凋亡概念81.1.2细胞凋亡特征81.1.3细胞凋亡与细胞程序性死亡81.1.4细胞凋亡与细胞坏死的区别8-91.2CASPASE9-121.2.1Caspase特性及分类9-101.2.2Caspases家族成员10-111.2.3启动Caspase111.2.4鳞翅目昆虫的凋亡效应因子111.2.5Caspas

6、e在细胞凋亡中有重要作用11-121.3昆虫细胞凋亡的信号通路12-141.3.1类似于哺乳动物细胞的凋亡通路12-141.3.2线虫细胞的凋亡信号通路141.4本研究的目的和意义14-162.实验材料和方法16-272.1实验材料16-182.1.1昆虫细胞162.1.2菌种162.1.3主要试剂与试剂盒162.1.4试剂的配置16-182.1.5主要仪器设备182.2实验操作以及方法18-272.2.3Trizol法提取细胞总RNA182.2.4RT-PCR法对目的基因Caspase扩增18-212.2.5

7、RACE法对斜纹夜蛾Caspase基因cDNA扩增21-273.实验结果27-353.1SL-1总RNA电泳检测273.2SL-1的CASPASE基因片段的PCR扩增及序列测定27-293.3SL-1CASPASEcDNA3’末端扩增29-303.4SL-1CASPASEcDNA5’末端扩增30-313.5cDNA全长与分析313.6序列比对及分析31-353.6.1同源性比较31-343.6.2系统发育分析34-354.讨论35-37参考文献37-41致谢41