当归提取物的鉴定及镇痛活性观察.doc

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1、当归提取物的鉴定及镇痛活性观察【摘要】目的鉴定当归提取物的主要化学成分,并观察其镇痛作用。方法采用Molish反应和Fehling实验反应对当归提取物进行鉴定,苯酚硫酸法测定其糖含量;采用小鼠扭体法和热板法观察当归提取物的镇痛作用。结果当归提取物的主要成分为多糖,其糖含量为81.4%,此提取物可明显抑制醋酸所致小鼠扭体反应,提高小鼠痛觉反应的痛阈。结论此当归提取物主要成分为多糖,具有明显的镇痛作用。【关键词】当归提取物;鉴定;多糖;镇痛作用  ABSTRACT:ObjectiveToidentifyandanalyzethemaincompositionof

2、AngelicaSinensisextractandtoinvestigateitsanalgesiceffect.MethodsTheidentificationtestwasprocessedwithMolishtestandFehlingtest,thepolysaccharidecontentanalysiswasprocessedbyphenolsulfuricacidreaction.Theanalgesiceffectwasinvestigatedbyaceticacid—inducedwringingtestandhotplateproce

3、dureinmice.ResultsThemaincompositionofAngelicaSinensisextractwaspolysaccharide,thepolysaccharidecontentofAngelicaSinensisextractwas81.37%.Thefrequencyofwringingreactioninducedbyaceticacidwasobviouslydecreased,andthepainthresholdofmiceinthehotplateprocedurewasincreasedaftertheanimal

4、swereadministeredwithAngelicaSinensisextract.ConclusionTheresultindicatesthatthemaincompositionofAngelicaSinensisextractispolysaccharide,anditpossessessignificantanalgesiceffect.  KEYWORDS:AngelicaSinensisextract;Identification;Polysaccharide;Analgesiceffect  当归AngelicaSinensis(Oliv

5、.)Diels是祖国医学中最常用的中药材之一,可用于活血通经、虚寒腹痛,亦可治跌打损伤。当归在历代方剂中应用频度极高,已被证明具有复杂的生物活性[1~3]。我们从当归中提取到一种组分,对其主要成分进行了初步鉴定,并观察了其镇痛作用。  1材料和方法  1.1仪器与药品  Savantecs100UVS400A冷冻真空干燥机;RB200智能热板仪,成都泰盟科技有限公司。葡萄糖对照品,Amresco。阿司匹林片,昆明制药厂,临用前取研碎后配制成12g/L的浓度。  1.2实验动物5  昆明小鼠50只,雌性,体质量20±2g,购于湖北省医学科学院。  1.3当归

6、提取物的制备  当归100g,切片,乙醇回流后100℃沸水提取,提取液60℃减压浓缩至60ml,加入95%乙醇3200ml,充分搅拌,-20℃静止48h后取上清,用乙酸乙酯萃取,收集水相,上大孔树脂柱,分别用甲醇、乙醇、水过柱,收集水洗脱组分,60℃减压浓缩后加入适量丙酮,4000rpm离心10min,收集沉淀,用水溶解后挥去溶剂,活性炭过滤,滤液-80℃冰箱预冻2天后于冷冻干燥机冷冻至干燥。  1.4试剂制备  (1)Fehling试剂:6.25gCuSO4加水定容至100.0ml,普通滤纸过滤;34.9g酒石酸钾钠与10.0gNaOH加水定容至100.0m

7、l,普通滤纸过滤。临用前两滤液等体积混合。  (2)5%苯酚试剂:取苯酚100.0g,加铝片0.1g和NaHCO30.05g,蒸馏,收集182℃馏分,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内冷藏备用。  (3)当归溶液:取冻干的当归提取物,分别配成9.0g/L、18.0g/L、36.0g/L的溶液,115℃灭菌30min后备用。  1.5当归提取物的鉴定  (1)Molish反应:取当归提取物10.0mg,加水1.0ml溶解,加2滴15%α萘酚乙醇溶液,混合摇匀后,沿管壁缓缓加入硫酸0.50ml,将试管静置10min后50℃水浴5min,,观察在两液面交

8、界处有无紫红色环出现。  (2)Feh

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