系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群的变化.doc

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1、系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群的变化【摘要】目的：研究系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法：对30例患者和20例健康者，采用特异性荧光抗体标记，流式细胞检测T淋巴细胞亚群的变化。结果：SLE活动组CD4+细胞数明显降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值明显降低（P<0.05）。结论：T淋巴细胞亚群在SLE的发病机制中起重要作用。【关键词】系统性红斑狼疮；T淋巴细胞亚群;流式细胞术　　TheChangeofPeripheralBloodTLymphocyteSubsetsinPatientswithDiff

2、erentClinicalTypesofSystemicLupusErythematosus　Abstract:ObjectiveTostudythechangeofTlymhocytesubsetswithsystemiclupuserythematosus.Methods30patientswithsystemiclupuserythematosusand20casesofhealthysubjectswereinvestigatedandthechangeofTLymphocytesubsetswerecountedbyflowcytometer.Resul

3、tsDecreaseinCD4+cellsandwasobservedinSLEpatients(P<0.05).ConclusionTlymphocyteisplayanimportantroleinthedevelopmentofSLE.Keywords:Systemiclupuserythematosus;Tlymphocyte;Flowcytomety系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性疾病，存在免疫功能的紊乱，但其发病机制及机体内免疫调节细胞的具体变化尚未完全明确。本研究采用特异性荧光抗体标记流式细胞术，探讨SLE患者在疾病的不同阶段外周血CD

4、3+、CD4+、CD8+淋巴细胞的变化，为阐述SLE患者存在的免疫功能紊乱、揭示SLE的发病机制提供实验依据。　　1资料与方法　　1.1临床资料　　SLE患者30例，其中女29例，男1例，年龄17岁~54岁，平均年龄31.8岁，所有病例均符合1982年美国风湿病学会（ARA）修订的SLE诊断标准［1］。采用1992年欧洲SLE活动性评分标准判断SLE的病情活动性［2］。其中活动期SLE18例（活动期患者未用糖皮质激素），非活动期SLE12例,正常对照组为20例健康志愿者。　　1.2主要试剂和仪器3　　双色标记单抗CD3+、CD4+分别与FITC、PE荧光素结合；含

5、beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads;FACS溶血素（均为美国BD公司产品）。FACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司）。　　1.3实验方法　　标本处理：抽患者外周血2ml,用肝素钠抗凝管保存，6h内分析;向TrueCount管中分别加入20μl抗体和50μl的抗凝全血,振荡混匀3s，避光放置15min；加入FACS（1X）溶血素2ml，充分混匀，室温避光10min；1000rpm/min离心5min,弃上清；加入2mlPBS洗一次;800rpm/min离心5min,弃上清；流式细胞仪上机检测。数据获取与分析使用CaliBRITE标

6、准微球、FACSComp软件调节FACSCalibur流式细胞仪PMT电压、荧光补偿、灵敏度，应用SimulSET分析软件对处理好的标本进行CD3+、CD4+、CD8+相对计数。　　1.4统计学分析　　采用SPSS8.0统计软件，所有数据以均数标±准差（±s）表示，组间比较采用t检验进行数据分析。　　2结果SLE患者外周血T细胞亚群检测结果见表1，SLE活动期患者与正常组比较CD4+细胞数明显降低（P<0.05）；CD4+/CD8+比值降低（P<0.05）。SLE活动期患者与正常组比CD8+细胞数差异无显著性（P>0.05）。表1SLE患者与正常

7、人T淋巴细胞亚群比较（略）注：*与正常对照组比较，P<0.05；Δ与正常对照组比较，P>0.05。　　3讨论正常免疫应答过程有依赖于各种免疫细胞，特别是各T细胞亚群之间的相互协作和相互制约。若某一T细胞亚群的数量和功能发生异常，机制就出现免疫紊乱，并发生一系列病理变化。SLE是一种自身免疫性疾病，存在免疫调节功能紊乱。国内外对SLE患者T细胞亚群的研究有很多，但结果不太一致。过去多数研究认为［3］在SLE活动期，CD4+（辅助/诱导T细胞）升高，CD8+（抑制/杀伤T细胞）下降，CD4+/CD8+比值升高，认为SLE的发病与上述T细胞亚群的改变有关，尤

8、其是CD8