乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞AgNORs含量及NK细胞活性相关性 .doc

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1、乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞AgNORs含量及NK细胞活性相关性作者：石铭张静韩博石龙【关键词】NK细胞【摘要】目的探讨肝炎患者外周血T淋巴细胞AgNORs含量及NK细胞活性变化。方法对198例肝炎患者及30例正常人进行T淋巴细胞AgNORsNK细胞活性及HBV-DNA含量检测。结果乙肝患者随着病情的加重，T淋巴细胞AgNORs含量逐渐降低，急性肝炎患者NK细胞活性与轻度慢性肝炎之间比较无差异外，与其他各型肝炎比较，差异均有非常显著性（P<0.01），各型肝炎间HBV-DNA含量差异无显著性

2、。肝炎患者体内HBV-DNA含量对T淋巴细胞AgNORs含量、NK细胞活性无影响。结论T淋巴细胞AgNORs含量及NK细胞活性在肝硬化患者中极度降低，可以作为一项监测肝炎患者病情轻重的指标。关键词乙型肝炎AgNORsNK细胞【Abstract】ObjectiveTostudythechangebetweenthequantityofAgNORsinTLymphocytecellandNKactivityintheperipheralbloodofhepatitsB.MethodsWeselecte

3、d198patientsofhepatitisBand30normalpeoˉple，whomwereexaminedthequantityofAgNORsinTLymphocytecellandNKactivity.ResultsThequantityofAgˉNORswasreducedwiththedamageofthelivertissue.Amongthepatients，theNKavtivitychangedsignificantlyexcepttheacuteandmildpati

4、ents，thequantityofHBVDNAisnotevidentlychanged.ItshowsthatthereisnorelationbeˉtweenthequantityofHBVDNAAgNORsandNKactivity.ConclusionThequantityofHBVDNAandAgNORsreˉducedevidentlyinlivercirrhosispatients，itcanbeusedasafactortosurveythedamageoftheliver.Ke

5、ywordshepatitisBAgNORsNK各种病毒感染均可导致机体免疫系统功能的变化。乙型肝炎病毒（HBV）感染后发的免疫系统改变是一令人普遍关注的问题。而T淋巴细胞及NK细胞则是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群，正常情况下T淋巴细胞及NK细胞群相互作用，维持着机体正常的免疫功能，当T淋巴细胞及NK细胞的活性发生异常时，就可导致机体免疫功能紊乱，并发生一系列的变化，机体的细胞免疫功能状态的好坏又与乙型肝炎病毒的清除密切相关。本课题通过对不同肝炎患者按照病理组织学诊断进行病理分级，来观察肝

6、炎患者间外周血T淋巴细胞AgNORs含量和NK细胞活性变化。41资料与方法1.1病例选择198例乙肝病人为我院2001年12月～2003年11月住院病人，病人肝穿诊断标准参照2000年全国第十次（西安）传染病与寄生虫病会议修订的诊断标准。1.2实验方法（1）T淋巴细胞AgNORs活性测定:无菌条件下取0.5ml抗凝血加入含RPMI1640培养液的瓶中，置37℃培养箱中72h，分离T淋巴细胞并低渗破膜后硝酸染色，以核仁呈淡黄色，AgNORs颗粒呈棕褐色为佳。上机用KL型计算机免疫图像分析系统每例随机

7、检测30个T淋巴细胞核仁银染面积与核面积比例（I・S%），取其平均值为检测结果。（2）HBV-DNA含量检测采用PE5700基因荧光定量诊断系统，报告结果以拷贝/ml表示（试剂为达安基因有限公司）。（3）NK细胞活性采用MTT比色法检测，MTT由瑞士生产，KH562细胞由北京生物所提供，10%SDS液SIGˉMA公司生产。采用密度梯度离心法分离获得PBMC。用培养液调至5×106/ml作为效应细胞，将对数生长期的K502细胞用培养液调至2.5×106/ml作为靶细胞。PG3033A型

8、酶标仪（华东电子管厂出品）测504nmDD值，结果以百分率表示。计算NK细胞毒活性公式:｛靶细胞-（实验孔DD-效应细胞DD）｝×100%靶细胞1.3统计学方法检验结果以ˉx±s表示，用SPSS8.0软件，以t检验作为显著性检验。2结果2.1各型肝炎患者外周血T淋巴细胞AgNORs含量、NK细胞活性与HBV-DNA含量之间的比较急性肝炎45例，年龄25～51岁，平均（27±10.9）岁。轻度慢性肝炎39例，年龄19～82岁，平均（41±12.9）岁。中度慢性肝炎52岁，年龄31～6