氯化汞对斑马鱼的胚胎毒性及成鱼的生殖毒性研究

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1、？４主砵笟硕士学位论文氬化象对农马食鲂ＪＫ蘼？牲反成Ａ的生破毒牲研秃张群芳？撗导教师．李英文教授专业名称：动物学研究方向：水生动物生态健康二〇—八年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作。与我的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明。学位论文作者签名：樣＃為签字日期：：＾沒年６月钟日学位

2、论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解重庆师范大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本Ｔｄｆ权重庆师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印。、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文？义学位论文作者签名．旅￥签字日期：從年〈月今曰重庆师范大学硕士学位论文氯化汞对斑马鱼的胚胎毒性及成鱼的生殖毒性研究硕士研究生：张群芳指导老师：李英文教授学科专业：动物学所在学院：生命科学学院重庆师范大学2018年5月AThesisSubmittedto

3、ChonqingNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterStudyonembryonictoxicityandreproductivetoxicityofmercuricchlorideinzebrafishCandidate:ZhangQunfangSupervisor:ProfessorLiYingwenMajor:ZoologyCollege:CollegeoflifesciencesChongqingNormalUniversityMay,2018重庆师

4、范大学硕士学位论文中文摘要氯化汞对斑马鱼的胚胎毒性及成鱼的生殖毒性研究摘要汞（Hg）是一种全球性重金属污染物，广泛分布于水环境中，严重威胁鱼类生存并通过食物链危害人类健康。在自然界中，汞主要以汞元素、无机汞和有机汞三种形式存在，而以有机汞（尤其是甲基汞）的毒性最强。因此，目前的研究主要关注有机汞对鱼类的毒性效应，而无机汞作为工业废水中汞排放的最主要形式，其对鱼类的毒性研究十分缺乏。本文首先以斑马鱼胚胎为研究对象，从发育参数、总汞含量、氧化应激和免疫应答方面探讨了氯化汞（HgCl2）暴露对斑马鱼的胚胎毒性；然后以斑马鱼成鱼为研究对象，从性腺的组织学结构、性激素水平、抗

5、氧化状态及下丘脑-垂体-性腺（HPG）轴相关基因表达水平等方面，明确了HgCl2暴露对斑马鱼成鱼的生殖毒性。1.HgCl2暴露对斑马鱼的胚胎毒性为了研究HgCl2暴露对斑马鱼的胚胎毒性及其机理，将斑马鱼胚胎从受精后2+2+2h暴露于0（对照）、1、4、16μg/LHg的水体中至168h。结果显示：16μg/LHg暴露导致斑马鱼胚胎/仔鱼发育损伤（死亡率和畸形率增加、体长较短、孵化率下2+降、孵化时间延长）；与体内总汞含量随Hg浓度的升高和暴露时间的延长而增加；2+同时，Hg暴露影响了抗氧化酶（CAT、GST和GPX）的活性，GSH和MDA的含量以及抗氧化相关基因（c

6、at1、sod1、gstr、gpx1α、nrf2、keap1、hsp70和mt）2+的mRNA表达水平；此外，Hg暴露上调了先天免疫相关基因（il-1β、il-8、il-10、tnfα2、lyz和c3）的表达水平。因此，本研究表明HgCl2暴露能诱导斑马鱼胚胎/仔鱼的发育损伤、氧化应激和免疫毒性。2.HgCl2暴露对斑马鱼成鱼的生殖毒性为了研究HgCl2暴露对斑马鱼成鱼的生殖毒性及其机理，将雌、雄斑马鱼成鱼2+2+分别暴露于0（对照）、15、30μg/LHg的水体中30d。结果显示：Hg暴露损伤了斑马鱼精巢和卵巢的组织学结构；改变了性腺中抗氧化酶（CAT、GST和G

7、PX）的活性和相关基因的mRNA水平，以及GSH和MDA的含量。在雌鱼中，尽管卵巢17β-雌二醇（E2）含量保持相对稳定，但脑中lhβ、gnrh2、gnrh3和卵巢中lhr2+和erα的表达显著下调；在雄鱼中，Hg暴露导致精巢中睾酮（T）水平显著降低，且脑中gnrh2、gnrh3、fshβ和lhβ以及精巢中fshr、lhr、ar、cyp17和cyp11b的表达水平下调。因此，本研究表明，HgCl2暴露通过诱导斑马鱼性腺的氧化胁迫，从而损伤其组织学结构；同时，HgCl2通过调节HPG轴相关基因的转录而影响性I重庆师范大学硕士学位论文中文摘要激素的分泌。此外，HgC