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1、蛋白芯片检测肿瘤标志物的临床应用作者：范公忍,任永强,邓涛,陈天宝,胡大荣【关键词】恶性肿瘤；肿瘤标志物;蛋白芯片;检测早期诊断与早期治疗是防治肿瘤与降低死亡率的最有效方法。寻找具有早期诊断价值的肿瘤标志物（TM）长期以来为人们所关注。生物芯片具有可并行检测多种肿瘤标志物的特点；为探讨其在临床肿瘤中检测上的价值。本文应用上海数康生物有限公司新开发的HD2001A型生物芯片检测仪和深圳威康生物蛋白芯片试剂对168例健康体检者和211例已知的各期各种肿瘤患者进行检测。追踪观察了36例肿瘤患者手术前后血清中的肿瘤标志物，现将结果报告如下。1资料与方法1.1临床资料本组恶性肿瘤患者211例，男
2、126例，女85例，中位年龄18～84岁，临床分期II～IV期，以手术所见和病理检验结果为诊断各类肿瘤金标准;健康对照组168例，其中男96例，女72例，中位年龄23～69岁，为我院健康体检者各项化验指标均正常。1.2标本收集空腹采集静脉血2ml,不抗凝;1000r/min,离心5min;取血清转移至另一干净的EP管内放置-20℃冰箱内保存,一周内统一检测。1.3仪器与试剂采用HD2001A生物芯片检测仪（上海数康生物有限公司产品）主要包括控制器和计算器，HDC12/48型肿瘤标志物蛋白芯片试剂购自深圳威康生物有限公司，操作按诊断系统说明书进行。1.4结果判定按照试剂盒使用说明书，检测
3、项目及正常值范围确定为:AFP<20μg/L,CEA<5μg/L,NSE<13μg/L,CA125<20ku/L,CA153<35ku/L,CA242<20g/L,CA199<20Ku/L,PSA<5μg/L,freepSA<1ng/L,ferritin<219μg/L,βHCG<3Iu/LHGH<7.5μg/L。41.5统计学处理检验结果以均数±标准差表示，采用t检验和χ2检验，P<0.05为有显著性意义之界值。2结果2.1蛋白芯片检测临床常见肿瘤的检测例数和阳性率肝癌41例（87.8%）、肺癌35例（8
4、0.0%）、胃癌46例（80.4%）、结肠癌19例（84.2%）、食道癌40例（22.5%）前列腺癌12例（66.7%）乳腺癌7例（71.4%）、卵巢癌3例（66.7%）、胰腺癌3例（100.0%）、胆囊癌5例（80.0%），蛋白芯片检测肿瘤患者有385个数据超过临界值；健康对照组仅有6个数据超过临界值。2.2蛋白芯片检测结果与病理诊断结果比较经χ2检验蛋白芯片检出例数少于病理诊断（χ2=12.36，P<0.01），两种方法的符合率为96.32%，芯片法对肿瘤标志物的敏感性为95.87%,特异性为92.11%。2.336例原发性肝癌患者手术前后及转移复发相关指标检测结果比较术后7种肿
5、瘤相关标记物水平明显低于手术前(P<0.05)，有显著性差异；而当术后转移复发时,其检测结果则于术前比较差异无显著性(P>0.05)。2.4精密度检验同一标本在同一条件下做20次平行测定，计算其批内误差，CV值为1.72%～3.85%。将20个不同批次的内标数据统计分析计算批内误差求其变异系数值,CV值为3.47%～6.37%。3讨论肿瘤标志物在临床上已应用了多年，尽管为肿瘤的诊断和疗效观察起了很大的作用，但在应用过程中，单指标检测存在着特异性不强、阳性率低等不足。为了提高诊断的准确性，临床上常将几项相关的标志物组成联合标志物检测谱，同时对某一肿瘤进行检测，以提高肿瘤诊断的准确
6、性[1，2]。蛋白质芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，它能同时对12种肿瘤标志物进行检测。该系统原理是基于双抗夹心法的化学发光检测方法，在固相基质上吸附有包被12种肿瘤标志物单克隆抗体，捕捉被检者血清中对应的肿瘤标志物，然后结合第二代抗体（携带有示踪标记物），通过催化化学反应产生光信号，用配套的生物芯片阅读仪读取光信号，对肿瘤标记物含量进行定量检测[3，4]。本文对211例常见肿瘤患者血清样本中的肿瘤标志物含量进行了检测分析,结果显示:该系统对肝癌的诊断率为87.8%,对肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌及胆囊癌的诊断率均达到80%以上；比较蛋白芯片与病理诊断两种方法的符合率
7、为96.32%(χ2=12.36,4P<0.01)。蛋白质芯片法对肿瘤标志物的敏感性为95.87%,特异性为92.11%。与以往文献报道基本一致[5]。初步研究结果显示该系统对各种肿瘤的诊断和治疗效果的评价有一定的帮助。本文还追踪观察了36例原发性肝癌患者手术前后相关肿瘤标志物水平的变化。肿瘤切除后,其标志物水平随之降低,术后7种肿瘤相关标记物水平明显低于手术前(Ｐ<0.05)有显著性差异；而当术后转移复发时
