冷沉淀的制备及应用范围

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1、冷沉淀的制备及应用范围冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~6℃条件下不溶解的白色沉淀物,它是P00l博士在1964-1965年期间发现的,被加热37℃时呈溶解的液态,主要含有第Ⅷ因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子(VWF)、第ⅩⅢ、以及纤连蛋白等成分。现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。1 冷沉淀的制备与质量1.1 冷沉淀的制备 选取健康无偿献血者,各项检查指标合格,采集400mL全血后6~8h内经分离新鲜液体血浆于-50℃冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30℃保存。制备冷沉淀时,将-30℃保存血浆放置于1~6℃环境

2、下溶解、分离出冷不溶物,放置-30℃冻存或直接应用于临床。1.1.1离心法(Pool)1.1.1.1原料血浆的融化1.1.1.1.14℃冷藏箱法:将原料血浆从-30℃冰箱内取出,置于1~6℃冷藏箱内缓慢融化。1.1.1.1.2水浴融化法:将原料血浆从-30冰箱取出,值室温5分钟,待双联袋间的塑料管变软后,放入15℃水浴箱内,启动摇摆装置,约30分钟后温度调至4℃,当原料血浆袋全部融化时(约60~90分钟),然后把水温调至0~2℃。1.1.1.2融化后的原料浆于0~4℃以离心力2000g离心10分钟,使冷沉淀下沉于塑

3、料袋底部,快速去除上清液,剩20~30mL左右即为冷沉淀。1.1.2连续融化虹吸法(Mason),将原料浆袋置于1~6℃水浴装置中,另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋,两袋之间形成一定的落差,血浆溶化后随时被虹吸至空袋内,当融化至剩下40~50ml时,闭合导管,阻断虹吸,将冰冻血浆袋和冷沉淀热和断离。1.2 冷沉淀的质量 冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第Ⅷ因子含量偏低;说明温度对冷沉淀质量有影响。经研究使用亚甲蓝光照法(MB)进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较,Ⅷ因

4、子和血管性血友病因子(Vwf)活性分别别下降30%和11%,纤维蛋白原浓度下降40%。血液4℃保存18h其Ⅷ因子含量与6℃保存6~8h相比下降23%,冷沉淀制备时间对凝血因子含量有影响,FFP一旦融化,Ⅷ因子活性随时间延长而明显降低,12h衰减41.17%,24h衰减42.82%,改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀FⅧ含量明显高于Pool。因此,制备冷沉淀一定要控制好各方面影响因素,包括时间、温度、制备等,同时选择制备方法,locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayf

5、ocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame采血过程的冷链控制,只有保证血浆中各种凝血因子的有效成分,才能制备出高质量的冷沉淀。1.3 冷沉淀的安全性 细菌污染是血液制剂危险因素之一,因而,加强皮肤消毒,加强菌血症或潜在菌血症献血者的献血前筛查,可有效避免静脉穿

6、刺发生的细菌污染,提高输血安全系数。巨细胞病毒(HCMV)与输血密切相关,输血存在传播HCMV的风险,也可以激活受血者体内潜伏的HCMV。血液检测技术可以有效避免或降低经血传播病毒的输血传播,但是,由于血液检测方法灵敏度问题,新病毒出现或病毒变异及血液检测项目有限,尤其是血清学检测技术存在“窗口期”、病毒变异、免疫沉默等原因造成漏检,使这些漏检的血液存在感染性,血液质量存在隐患,说明冷沉淀制剂不可能达到零危险,仍然有感染病毒的风险。而病毒灭活技术对原料浆进行处理,对血液制剂的安全性有了重要保障,冷沉淀的病毒灭活主要

7、为有机溶剂法(SD),经灭活后,Ⅷ因子和血管性血友病因子(VWF)和纤维蛋白原的平均回收率均大于93%,用SD法在小范围内进行病毒灭活,结果血浆蛋白的回收率很好,对HIV、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的灭活指数分别达到4.17、7.73和4.72。该方法对密封袋内小剂量汇集的冷沉淀进行病毒灭活不但能够提高病毒灭活的性能,而且可以提高Ⅷ因子、VWF和纤维蛋白原的活性。有资料证明,规律性地使用Ⅷ因子预防性治疗可减少血友病A患儿出血的频率,使用重组Ⅷ因子成本较高,然而,通过病毒灭活的冷沉淀可以降

8、低治疗成本。2 冷沉淀的适应证及使用剂量2.1 冷沉淀的适应证和剂量 冷沉淀主要用于补充凝血因子,血友病A是常见的出血性疾病之一,患者终身需要补充Ⅷ因子治疗或预防出血。还用于体内凝血因子过度消耗或患严重肝脏疾病或体内产生相应凝血因子抗体而导致凝血因子活性降低或丧失的获得性凝血因子缺乏症以及烧伤、外科手术、肝脏移植等患者。冷沉淀用于外科手术或出血倾向疾患时,可

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