邻苯二甲酸二_论文

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1、邻苯二甲酸二作者：宋晓峰，魏光辉，邓永继，张德迎，陈旋，刘星【关键词】二甲酸二【Abstract】AIM:ToexplorethemRNAexpressionofINSL3geneinLeydigcellsoffetalandneonatalmiceexposedtodi(2ethylhexyl)phthalate(DEHP)invivoandinvitro.METHODS：TheLeydigcellswereisolatedfromfetalmousetestisandwereculturedinDMEM/F12mediumandidentifiedby3betahydroxysteroid

2、dehydrogenase(3βHSD).Reversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR)andinsituhybridizationwereusedtoexaminetheexpressionlevelsofINSL3mRNAinprimarilyculturedLeydigcellsincubatedwithDEHP(atthedoseof50，100，200mg/L,respectively).PregnantmicewereexposedtoDEHPatthedoseof100，200or500mg/kgbodyweightperda

3、ybygavagefromgestationday(GD)12topostnatalday（PND）3.TheexpressionofINSL3geneinneonatalmousetestiswasinvestigatedbyRTPCR.RESULTS:12/12HistologicalalterationsofprimarilyculturedLeydigcellsandneonatalmousetestisexposedtoDEHPwereobserved.TheexpressionlevelofINSL3mRNAinDEHPtreatedgroupsincludingtheprimar

4、ilyculturedLeydigcellsandmalemouseoffspringstestiswerelowerthanthoseofthecontrolgroups.CONCLUSION:DEHPcandownregulatetheexpressionlevelofINSL3mRNAinLeydigcellsinvitroandinvivo.ItmaybeapossiblemechanismthatDEHPinterfereswithgubernaculumdevelopmentandcausescryptorchidism.【Keywords】Di(2ethylhexyl),phth

5、alate；fetus；Leydigcell；insituhybridization；RTPCR【摘要】目的：通过体内体外实验探讨邻苯二甲酸二（2乙基）己酯(DEHP)对胚胎及新生小鼠睾丸Leydig细胞INSL3mRNA表达的影响.方法：DEHP50，100，200mg/L分别作用于原代培养的小鼠胚胎Leydig细胞，应用RTPCR和原位分子杂交技术检测DEHP对Leydig细胞INSL3mRNA表达的影响；DEHP分别以低、中、高三组剂量（100，200和500mg/kg・d）灌胃作用于GD（Gestationday）12～PND（Postnatalday）3孕鼠，RTPCR检测新生小鼠睾

6、丸INSL3mRNA表达的相对强度.12/12结果：DEHP改变原代培养的小鼠胚胎Leydig细胞和新生小鼠睾丸的形态结构；各实验组包括原代Leydig细胞及不同时间点的新生鼠睾丸INSL3mRNA表达水平、表达相对强度均明显低于对照组(P【关键词】2乙基己基,邻苯二甲酸；胚胎；Leydig细胞；原位分子杂交；逆转录聚合酶链反应0引言邻苯二甲酸二（2乙基）己酯（DEHP），是塑料工业中广泛使用的增塑剂，是邻苯二甲酸酯类化合物（PAE）中的一种，也是公认的环境内分泌干扰物，可影响机体内分泌的活性.研究发现邻苯二甲酸酯类化合物与先天性疾病如隐睾、尿道下裂等的发病具有明显的相关性［1-3］.我们拟通

7、过体内体外实验研究DEHP对胚胎及新生小鼠睾丸Leydig细胞胰岛素样因子3(INSL3)mRNA表达的影响，探讨其与隐睾发病的相关分子机制.1材料和方法材料昆明小鼠由重庆医科大学动物中心提供,合格证号为SYXK（渝）20170001.孕期计算以成年雌雄小鼠合笼后，雌鼠见阴栓为受孕0d.12/12DMEM/F12(Hyclone公司),胎牛血清（天津TBD公司），DEHP（上海化学试剂有限公司），