银杏组织培养的研究方案

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1、银杏组织培养的研究方案03应生李厚程2005年5月10日1﹑研究目的和意义。银杏有叫白果树,是我国的特产,浙江天目山地区有野生,现广泛栽培于广东以北沈阳以南的广大地区。具有较高的观赏价值和药用价值,木材可做雕刻、建筑、家具材料，种仁可食用或药用。其繁殖方法有播种、嫁接、扦插、分蘖，但这些繁殖方法的繁殖速度都比较慢，还不能满足市场的需求，用组织培养的方法可在短时间内获得大量的无菌苗，从而能迅速的扩大种植面积。2、研究方法（1）初代培养①培养基配方①②③④⑤⑥大量元素HMSMSHMSMS微量元素MSMSMSMS

2、MSMS铁盐MSMSMSMSMSMS有机元素MSMSMSMSMSMSBA1.02.02.01.02.02.0KT2.02.02.02.02.02.0IBA0.50.5——0.50.5——NAA————1.0————1.0肌醇100100100100100100烟酸1.02.00.51.02.00.5VB51.02.01.01.02.01.0VB60.51.01.00.51.01.0甘氨酸2.03.02.02.03.02.0PVP——0.25%0.5%0.25%活性碳——0.2%糖3%琼脂0.6%PH5.8②

3、外植体的预处理编号灭菌处理方法175%酒精8秒钟2%次氯酸钠5分钟0.1%升汞5分钟无菌水冲洗4次275%酒精8秒钟2%次氯酸钠10分钟0.1%升汞8分钟无菌水冲洗4次375%酒精10秒钟2%次氯酸钠10分钟0.1%升汞8分钟无菌水冲洗5次475%酒精10秒钟2%次氯酸钠15分钟0.1%升汞10分钟无菌水冲洗4次③接种培养外植体经灭菌处理后接种到培养基上进行培养，25度40000LX下培养二十天后将诱导出愈伤组织，愈伤组织浅绿色半透明状。（1）继代液体摇床培养①培养基配方用初代培养中诱导愈伤组织最好的一组配

4、方去掉肌醇、烟酸、VB5、VB6、甘氨酸、PVP、活性炭等附加物，不加琼脂。②培养方法将初代培养中获得的愈伤组织切碎接种到液体培养基中进行液体摇床培养。（2）愈伤组织的诱导分化①培养基配方将培养基中细胞分裂素升高，将生长素降低，加0.6%琼脂。②培养方法将液体摇床培养所得的愈伤组织接到培养基上进行愈伤组织诱导分化，二十天左右将诱导出小苗。（3）生根培养①培养基配方用1/2MS+BA1.0+NAA0.03加0.2%的活性炭.②培养方法将愈伤组织诱导所得的小苗用刀切开接到生根培养基上进行生根培养，培养一个月左右

5、。