Skp2在膀胱上皮癌中的表达及意义.doc

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1、Skp2在膀胱上皮癌中的表达及意义作者：李朝争赵金媛张祥宏王华玖白杰关伟贾文平【摘要】目的：探讨细胞周期蛋白Skp2表达与膀胱移形细胞癌生物学行为的关系。方法：对73例膀胱移形细胞癌进行组织学分级及分期，另取22例正常膀胱组织作为对照，采用免疫组织化学方法SP法检测各例组织中Skp2蛋白表达水平，并分析其表达水平与临床病理特征的关系。结果：Skp2蛋白阳性表达率为50.7%(37/73)，Skp2蛋白表达与肿瘤组织学分级、病理分期显著相关。结论：Skp2是评估膀胱移形细胞癌恶性程度，估计预后有价值的指标。【关键词】膀胱移行细胞癌；Skp2;

2、免疫组织化学；表达【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatethesignificanceoftheproteinexpressionofSkp2intheprogressionandprognosisofbladdertransitionalcellcarcinoma.Methods:Thepathologicalstageandhistologicalgradewereassessedinthe73caseswithsurgicallyresectedbladdertransitionalcellcarcinoma

3、.Thenormalbladdertissueoftwentytwocaseswasusedascontrol.TheexpressionofSkp2wastestedbyimmunohistochemicalmethod,andtherelatedclinicalphaseanditsexpressionwereanalyzed.Results:TheexpressionrateofSkp2was50.7%.Skp2expressionwasrelatedwithhistologicalgradeandpathologicalstageo

4、ftumorsclosely.Conclusion:Skp2areimportantprognosticfactorsforpatientswithbladdertransitionalcellcarcinoma.【KEYWORDS】Bladdertransitionalcellcarcinoma;Skp2;Immunohistochemistry;Expression膀胱移行细胞癌（BTCC）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,具有生长缓慢、多发性、复发性等临床特点。它的发生发展受多种基因的调控，在细胞周期中，G1—S期转换的调控是一关键点，Skp

5、2和P27是近年来新发现细胞周期调控基因，主要参与G1—S期调控，是细胞从G1—S期转换的主要限速因子之一。Skp2是Fbox蛋白家族中重要的一员，通过泛素化降解P27蛋白，参与细胞周期调控，与肿瘤发生发展和预后密切相关[1]。本实验采用免疫组化技术对P27和Skp2在膀胱移行细胞癌及其癌旁或正常膀胱粘膜组织中的表达水平及相互关系，探讨Skp2与临床病理指标的相关性，评价对患者预后的价值。1材料与方法1.1一般资料4收集我院1998～2004年间手术切除后经病理确诊为膀胱移行细胞癌具有完整临床病理资料及组织标本共73例（TUR—Bt51例、

6、膀胱部分膀胱部分切除15例、根治性膀胱切除7例）病例。另外，选用22例非肿瘤粘膜供对照研究（其中12例为距肿瘤2cm以上的癌旁正常粘膜，另10例为正常膀胱粘膜）。全部标本均进行P27和Skp2蛋白检测。1.2试剂与方法Skp2鼠抗人单克隆抗体（克隆号1G12E9）,P27鼠抗人单克隆抗体（克隆号DCS—72.F6）均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。标本采用链霉卵白素—过氧化物（SP）法，具体操作按说明书进行，切片常规脱蜡至水，微波修复抗原，3%过氧化氢处理10min，抑制内源性过氧化物酶活性。正常羊血清处理15min减少非特异性背景。Sk

7、p2和P27单克隆抗体（抗体稀释比1∶50），一抗4℃孵育过夜，二抗处理15min链霉菌抗生素蛋白——过氧化物酶复合物处理15min，DAB显色来自水冲洗终止反应，苏木精复染、脱水、透明、封化。用磷酸盐缓释液替代一抗作为阴性对照，用已知乳腺癌作为阴性对照。1.3结果判定Skp2、P27以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性细胞[2]，在400倍光镜下观察10个视野，计数1000个肿瘤细胞计算阳性细胞百分率。1.4统计分析采用SAS统计分析软件，进行单因素方差分析临床病理资料与免疫组化结果以及Skp2和P27之间相关性，检验水准α为0.05，P<0

8、.05为统计学差异有显著性。2结果2.1Skp2在正常膀胱粘膜与膀胱移行细胞癌组织中的表达情况在正常22例粘膜中Skp2阳性表达率13.6%（3/33）。在73例膀