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时间:2018-08-08
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1、沙门氏菌typhimurium的cysJIH区域的描述而且大肠杆菌B为SIROHEME-Fe4S4有效中心的cysl及cysH及A模型的去氧核醣核酸序列,用菠菜基于胺基酸同系现象的REDUCTASE血红素蛋白REDUCTASE*(为出版收到,1989年三月15日)亚硫酸盐亚硝酸盐JacekOstrowski$,Jer-Yuarn的Wu5ll,大卫C.Rueger§llII,巴尼E.米勒$**,路易斯M.Siegel#ll$$,而且尼古拉斯M.Kredich$$$$5§从$霍华德修医疗的学会实验室和部门§生物化学和§§医学,公爵大学医疗中心、达拉姆、北卡罗莱那州27710和TBa
2、sic科学区分,退伍军人政府医疗中心,达拉姆,北卡罗莱那州27705沙门氏菌typhimurium的血红素蛋白成分亚硫酸盐reductase(还原型烟胺腺嘌呤二核酸磷酸)(EC1.8.1.2)是cysJ266的被净化的tohomogeneity一,突变异种紧张缺乏的亚硫酸盐reductase黄素蛋白。sirohemeandFe4S4-containinge的nzyme被隔离了当做一单节显性的63kDa的多月太而且有了一个混合不结扎的酶和一个合成物以亚硫酸盐。下列各项还原反应与5"deazaflavin-EDTAa的nd再化氧化作用,合成物被转换到这不合成物,高度地快速旋转含铁-
3、siroheme的州seenpreviously藉由大肠杆菌亚硫酸盐reductase血红素蛋白准备。S。typhimurium血红素蛋白展现接触反应的和物理性质相同这被大肠杆菌的尿素分解准备的血红素蛋白亚硫酸盐reductase全濥而且完全能干在再构成还原型烟胺腺嘌呤二核酸磷酸-亚硫酸盐的reductase活性方面当以被净化亚硫酸盐reductase的过度联合黄素蛋白。cysl和cysfHromS的去氧核醣核酸序列。typhimurium而且大肠杆菌B被决定了和,一起与先前报告数据,确认组织这一个区域当做促进剂-cysJ-cysI-cysH与所有三个基因在相同的方向定向从这促
4、进剂。分子的压重为CYSIencoded推论亚硫酸盐reductase血红素蛋白和为这cysH-改为暗码3"-phosphoadenosine5"-phosphosulfatesulfotransferase大约64,000和28,000,分别地。比较这推论亚硫酸盐reductase血红素蛋白的胺基酸序列藉由thatof菠菜亚硝酸盐reductase(BacEk,.,Burkhart,W。,Moyer,M。,Privalle,L。,而且Rothstein,S。(1988)摩尔。麝猫科将军。212,20-26),哪一个也包含siroheme和Fe4S4群,表示二群体包含半胱胺酸的
5、序列与这structuresC~顺式(X)~-acnydsCys-(X)&ys,是相应的在这两个酶中而且被要求到*这一个工作被国家卫生局授与支援了DK12828(对N.M.K.)、GM32210和GM21226(对L.M.S.),和在退伍军人政府计画授与215406554-01手边(对L.M.S.)。这一个制品的出版的费用部份地被支付被页的付款要价。这一个制品一定因此是藉此显着的"广告"符合18U.S.C.第1734节独自地标示这一种事实。这纸专心致志于亨利教授Kamin的记忆,谁的初期工作在siroheme上酶亚硫酸盐reductase而且亚硝酸盐reductase让这些研究
6、可能。11现在的住址:有创造力的生命分子、波士顿,文学硕士。**现在的住址:Abbott实验室,Abbott公园IL。$$到谁通信应该被演说。在两者蛋白质中提供Fe4S4群的配位体。从crystallographic的这些sequencesand(McRee、D.E.、理查森、D.C.、理查森,J.S.,而且Siegel,L.M.(1986)J.Biol。Chem。261,10277-10281)而且在文学中的分光镜的数据,一模型为structuroef被计划有效中心这些两个酶。沙门氏菌typhimurium和Escherichia的cysJIHoperonscoli入码活性必
7、需的为两步舞还原反应3"-phosphoadenosine5"对硫化物的phosphosulfate.(1)3"-Phosphoadenosine5"-phosphosulfatesulfotransferase,藉着cysH指定,catalyzestransferof硫醯分子的某部分3"-phosphoadenosine5"-phosphosulfate对硫氧还蛋白到给硫氧还蛋白-顺式的SOg-后来的衍生物(2,3)减少给自由的亚硫酸盐。亚硫酸盐然后接受一六电子的还原反应对反应的硫化物催化
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