黄芪和苦参不同剂量比组方对小鼠溃疡性结肠炎治疗作用研究

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1、黄芪和苦参不同剂量比组方对小鼠溃疡性结肠炎治疗作用研究熊永爱韩丽*（成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川成都611137）摘要:目的观察黄芪和苦参不同计量比对实验性小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。方法采用三硝基苯磺酸灌肠法制作溃疡性结肠炎，两种药材采用11个剂量比，按组方比例称取药材，醇水双提制备水煎液给药，治疗结束时测定MPO活性；处死动物取结肠，评价黏膜损伤指数。结果1)光镜下观察各给药组结肠黏膜病理损害程度明显轻于模型组，黄芪苦参低剂量比处方组也可见溃疡，有较明显的组织水肿和大量炎细胞浸润。黄芪苦参高剂量比组及柳氮磺胺吡啶组溃疡较少并可见已愈合的

2、溃疡组织，组织水肿和充血明显减轻，炎细胞浸润明显减少（P<0.05）。2)模型组小鼠结肠MPO明显升高，给药组小鼠MPO则明显低于模型组(P<0.01)。结论黄芪和苦参高剂量比（30g:9g）组方能显著对抗三硝基苯磺酸导致的小鼠结肠组织病理损伤，能增强整体炎性免疫反应，明显改善动物便血、腹泻、少动等外观体征，疗效明显。关键字：黄芪苦参溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis，UC)又称非特异性溃疡性结肠炎，是炎症性肠病(Inflammatoboweldisease，IBD)的一种[1]。IBD已成为公认的慢性腹泻的主要病因之一，并被认为是胃肠道

3、中除恶变外最严重的疾病之一。西医对本病治疗的药物主要为氨基水杨酸类、肾上腺皮质激素类、免疫调节剂等[2]，取得了一定的治疗效果，但因这些药物的毒副作用较大，不能长期使用，常导致病情反复。本研究拟以黄芪、苦参配伍，黄芪益气健脾升阳，治脾虚中气下陷、久泻久痢，苦参清热燥湿，治热痢，便血。通过对溃疡性结肠炎模型的药效学比较，确定黄芪、苦参最佳组方配比，达标本兼治之效。1．材料1.1动物：昆明种小鼠，清洁级，雌雄各半，体重18-22g，由成都达硕生物科技有限公司提供，合格证号:scxkc(111)2008-24。1.2药材：黄芪、苦参，购于四川利民中药饮片有限责任公司，经

4、成都中医药大学药学院中药标本中心卢先明老师鉴定，所购药材均符合《中华人民共和国药典》标准，按组方比例称取药材，醇水双提制备水煎液。小鼠剂量按成人用量的20倍给药。黄芪和苦参各组剂量比例（参照中国药典单味药材日用量随机配对）、小鼠灌胃体积见表-1。柳氮磺胺吡啶片，上海三维制药有限公司，生产批号：200804C04，小鼠按成人用量20倍给药，即1g/kg，药物用蒸馏水配成0.05g/mL，小鼠灌胃给药体积为0.2mL/10g。黄芪和苦参不同配比剂量及给药体积组别黄芪（g）苦参(g)给药体积(ml)给药浓度（g/ml*20g）配比组194.50.40.23配比组2970

5、.40.27配比组3990.40.30配比组4204.50.40.41配比组52070.40.45配比组62090.40.48配比组7304.50.40.58配比组83070.40.62配比组93090.40.65配比组103000.40.50配比组11090.40.15表-11.3试剂：三硝基苯磺酸(TNBS)：sigma公司生产，批号:107K5008。无水乙醇，乙醚、甲醛均为分析纯；髓过氧化物酶（MPO）试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号：20090918。2方法与结果2.1模型复制方法取小鼠，造模前禁食24h，乙醚麻醉，用小鼠灌胃针头轻轻从肛门插人，

6、深度为4cm，推人TNBS溶液(5%TNBS溶液和无水乙醇按1:1混合)80mgL/kg，捏紧肛门倒提30s，术后常规饲养[3]。2.2给药方法造模后第3天，将模型动物分为模型组，11个处方组，阳性药柳氮磺胺吡啶组，另设正常对照组，并同时开始按上述剂量给药，模型组及正常对照组给等体积蒸馏水，每天1次，连续7d。2.3检测指标2.3.1髓过氧化物酶活性按试剂盒说明书处理样本，并测定各组样本MPO活性用紫外检测器(UV1700型，Tecan公司生产)在460nm处测吸光值。2.3.2光镜检查剪取结肠病变最明显处2cm放于10%中性缓冲甲醛溶液中固定，酒精脱水，石蜡包埋

7、，切片厚度4-6微米，HE染色，光学显微镜检查。病变按以下标准进行分级：溃疡：分三级，0—无，1—小溃疡（小于3mm），2—大溃疡（大于3mm）炎症：0—无，1—轻度，2—重度肉芽组织：0—无，1—有病变深度：0—无，1—粘膜下层，2—肌层，3—浆膜层纤维化：0—无，1—轻度，2—重度2.3.4统计方法计量资料采用t检验。2.4实验结果2.4.1黄芪和苦参高剂量比组方能显著对抗三硝基苯磺酸导致的小鼠结肠组织病理损伤，能增强整体炎性免疫反应，明显改善动物便血、腹泻、少动等外观体征，疗效明显。结肠MPO活性测试结果表明模型组小鼠结肠MPO明显升高，给药组小鼠MPO则明

8、显低于模型