机采血小板常温保存时间对其冰冻质量的影响

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1、机采血小板常温保存时间对其冰冻质量的影响赤峰市中心血站张宏宇中图分类号：R-331文献标识码：摘要：目的　探讨单采血小板在常温下保存不同时间对其冰冻血小板质量的影响。方法　收集单采血小板30份，每份各留4个样本，每个样本分别在常温下保存0d、1d、2d、3d后再加入二甲基亚砜(DMSO)制备成冰冻血小板于-80℃的冰箱保存一个月，溶解测量冰冻血小板的PH、血小板数量(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分部宽度(PDW)、CD62p阳性率。结果　单采血小板在常温下保存2d(48小时)后再制备成冰冻血小板，冰冻血小板的PH、PLT、MPV、PDW和C

2、D62p的值变化不明显，但保存3d(72小时)后再制备成冰冻血小板，冰冻血小板的PH、PLT、和CD62p值变化不明显，而MPV、PDW却变化显著。结论　单采血小板可以先在常温下保存2d(48小时)后再加入DMSO制备成冰冻血小板而不影响冰冻血小板的质量。   由于常温下(22±2℃)单采血小板只可保存5天[1]，因此很多血站开展用DMSO低温保存血小板以备临床所需，但单采血小板可以先在常温下保存多长时间后再制备成冰冻血小板则没有明确的标准。为此，作者等对先在常温下保存不同时间的单采血小板再制备成冰冻血小板的相关指标进行检测，探讨血小板在常温下不同保存时

3、间对其冰冻血小板质量的影响。   1   材料与方法   1．1    标本来源　献血者所献的单采血小板30人份，每人份留取40ml样本分装于4袋ExtendedStoragePlate血小板专用保存袋(美国HAEMONEGICS®公司)，每袋10ml共120个样本。献血者的健康标准按文件[2]操作，30份机采血小板的质量全部符合文献[1]的要求。   1．2    仪器　苏州医用仪器厂生产的XHZ-IB型血小板恒温振荡保存箱(22±2℃)及KJX-1A冰冻血浆解冻箱；美国HAEMONEGICS®公司的MCS®+9000型血细胞分离机；AUDIOCOMA

4、C980电解质分析仪；法国Mythic18血细胞计数仪；TL-2000振荡仪；德国PARTECPAS流式细胞仪；EnglandU410-86超低温冰箱。   1．3    试剂　ExtendedStoragePlate血小板采集和保存管道(美国HAEMONEGICS®公司)；血细胞计数仪的配套试剂由百特公司提供；CD62p(GMP-140抗体-FITC)和专用鞘液由法国Immunotech公司提供；DMSO(美国ResearchOrganics)。   1．4   方法　献血者的血小板用MCS®+9000型血细胞分离机及相应的管道进行采集，采集后留取40

5、ml样本分装于4袋ExtendedStoragePlate血小板专用保存袋，每袋10ml。再把10ml样本放入血小板恒温振荡保存箱(22±2℃)保存，保存0d、1d、2d、3d后，在水平振荡60次/min的TL-2000振荡仪上每10ml的样本中加入0.6mlDMSO制备成冰冻血小板于U410-86超低温冰箱(-80℃)保存1个月。再把冰冻血小板样本于KJX-1A冰冻血浆解冻箱(38℃)中溶解，进行相关项目的检测。用电解质分析仪测PH；用血球计数仪测PLT，MPV，PDW。用血小板用专用鞘液调节血小板计数为5×106　/L，取100ul的稀释样本加入第一

6、试管中，再加入20ul的CD62p(GMP-140抗体-FITC)，在第二试管中加入鞘液100ul，再加入20ul的CD62p(GMP-140抗体-FITC)作为同型对照，两根试管避光保存20分钟，用PARTECPAS流式细胞仪测CD62p的阳性率。   1．5  统计处理　所得的数据以均数±标准方差X±5表示，采用t检验。    2    结果　单采血小板常温保存时间对其冰冻质量的影响见表1。单采血小板先在常温下保存2d(48小时)后再制备成冰冻血小板，冰冻血小板的各项指标变化不明显，但在常温下保存3d(72小时)后再制备成冰冻血小板，冰冻血小板的PH

7、、PLT、和CD62p值变化不明显(P>0.05)，而MPV、PDW却变化显著(P<0.05)。表1    单采血小板常温保存时间对其冰冻质量的影响　 0d1d2d3dt1t2t3PH7.10±0.277.08±0.347.02±0.257.00±0.380.2631.191.17PLT(×109/L)1080±2501003±2431025±2001012±2071.260.991.80MPV(fL)8.1±1.518.30±1.658.45±1.808.90±1.911.451.812.31*PDW(%)16.0±2.116.9±2.6317.2±2

8、.9417.5±2.871.481.822.62*CD62P阳性率(%)28.7