厦门大学生物化学实验讲义讲解

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1、生物化学实验厦门大学环境与生态学院2016.2目录实验室守则1实验记录及实验报告2实验一淀粉的提取和水解4实验二总糖与还原糖的测定6实验三粗纤维的测定9实验四酪蛋白的制备12实验五粗脂肪的定量测定─索氏提取法14实验六蛋白质等电点测定16实验七氨基酸的分离鉴定－纸层析法18实验八蛋白质含量的测定21实验九血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳34实验十影响酶活性的因素41实验十一碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定45实验十二凝胶过滤层析纯化碱性磷酸酶51实验十三DEAE-纤维素柱层析纯化碱性磷酸酶56实验十四底物浓度对酶活力的影响（米氏常数的测定）58实验十五聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋

2、白61实验十六聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点69实验十七SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质亚基分子量74实验十八维生素C的定量测定79实验十九猪脾DNA的制备84实验二十DNA的定量测定87实验二十一DNA的琼脂糖凝胶电泳89实验二十二RNA的定量测定92实验二十三肌糖原的酵解作用94实验二十四茶叶多糖的提纯与鉴定97仪器的使用99附录101i实验室守则1、遵守课堂纪律，认真进行实验每个学员应该自觉地遵守课堂纪律，维护课堂秩序，保持室内安静，不大声谈笑。实验过程中要听从教师指导，严格认真地按操作规程进行实验。并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上，完成实验

3、后经教师检查同意，方可离开实验室、实验后要认真写好实验报告，由课代表按期收交给教师，不无故拖延。2、保持整洁保持环境和仪器的整齐清洁是做好实验的重要条件，也是每个实验者必须养成的良好的工作习惯。实验台面和试剂药品架上都必须保持整洁，仪器药品放置要有次序，不要把试剂、药品洒在实验台面和地上，废液应倒进水槽内（强酸强碱必须都应倒入废品缸内，不可倒入水槽或随地乱扔。实验完毕需将仪器洗净收好，药品试剂排列整齐。注意保持实验台面干净及实验室整齐清洁。3、药品使用使用药品试剂必须注意节约杜绝浪费，要特别注意保持药品和试剂的纯净，药品用后须立即将瓶盖塞紧放回原处，从瓶中取出的试剂，标准溶液等，

4、如未用尽切勿倒回瓶内，避免混杂。4、仪器使用各种仪器用具均应注意爱护，细心使用，防止损坏，使用电子天平，分光光度计和离心机等贵重精密仪器，要严格遵守操作规程，发现故障立即报告教师，不要自己动手检修，要爱护国家财产，厉行节约。5、注意安全为了有效地维护实验室安全，保证实验正常进行，要求：1）要严格做到：火着人在，人走火灭；2）勿使乙醚、丙酮、醇类等易燃液体接近火焰，蒸发或加热此类液体时，必须在水浴上进行，切勿用直火加热；3）凡比水轻且不与水相混溶之物（如醚、苯、汽油等）着火时，应迅速用湿毛巾覆盖火焰，以隔绝空气使其熄灭，绝不能倒水于其上，以免火焰蔓延，对于易与水混溶之物（如乙醇、丙

5、酮等）着火时，可用火扑灭之；4）有不少药品是有毒或有腐蚀性的不可用手直接拿药品，不可将试剂瓶直接对准鼻子闻，更不可尝药品味道。用移液管吸取有毒试剂，强酸和强碱时，均应用洗耳球，严禁用口吸取；5）离开实验室时，要关好水龙头，拉下电闸，认真负责地进行检查，严防不安全事故；6）每次实验课由班长安排同学轮流值日，值日生要负责当天实验室的卫生、安全和一切服务性工作。107实验记录及实验报告一、实验记录实验课前应认真预习，将实验名称、目的和要求、原理、实验内容、操作方法和步骤等简单扼要地写在预习报告中。实验中观察到的现象、结果和数据，应该及时地直接记在预习报告中，绝对不可以用单片纸做记录或草

6、稿。实验记录不要抹擦及涂改，写错时可以准确地划去重写，记录时必须使用钢笔或圆珠笔。原始记录必须准确、简炼、详尽、清楚，从实验课开始就应养成这种良好的习惯。记录时，应做到正确记录实验结果，切忌夹杂主观因素，这是十分重要的。在实验条件下观察到的现象，应如实仔细地记录下来；在定量实验中观测的数据，如称量物的重量，滴定管的读数，分光光度计的读数等，都应设计一定的表格准确记下正确的读数，并根据仪器的精确度准确记录有效数字。例如，光密度值为0.050，不应写成0.05。实验记录上的每一个数字，都是反映每一次的测量结果，所以，重复观测时即使数据完全相同也应如实记录下来。总之，实验的每个结果都应

7、正确无遗漏地做好记录。实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式、分子量准确的浓度等，都应记录清楚，以便总结实验进行校对和作为查找成败原因的参考依据。如果发现记录的结果有怀疑、遗漏、丢失等，在获得老师允许后，应当重做实验。因为，将不可靠的结果当做正确的记录，在实际工作中可能造成难以估计的损失，所以，在学习期间就应一丝不苟，努力培养严谨的科学作风。二、实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果，写出实验报告．按照实验内容可分为定性和定量实验两大类，下面分别列举这两类实验报告