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1、猪源和牛源大肠杆菌耐药性比较试验32中国兽医杂志2011年(第47卷)第8期ChineseJournalofVeterinaryMedicine猪源和牛源大肠杆菌耐药性比较试验姚琼芬,陈孝杰,田伟,邓玉婷,郑红青,刘健华(华南农业大学兽医学院国家兽药残留基准实验室,广东广州510642)中图分类号:$852.61..2文献标识码:B文章编号:05296005(2011)08—0032—03近年来,由于抗菌药物在动物生产上的不合理使用,使得动物源细菌耐药性变得越来越严重,且动物源耐药菌极有可能通过直接接触和动物性食品(肉制品和奶制品)传给人类,对人类的健康造成危害,动物源细菌耐药性问题也因此受到
2、广泛的重视.大肠杆菌是一种重要的畜禽病原菌,常引起腹泻,尿道感染,腹膜炎,甚至败血症等.此外,大肠杆菌也是肠道菌群的共生菌,食品动物中治疗或预防性使用的抗菌药物给肠道中的大肠杆菌造成一种选择性压力,导致大量耐药大肠杆菌的出现,因此共生型大肠杆菌常作为抗菌药物选择压力的一个指示菌.肠道的内环境也为耐药基因的传递创造了良好的条件,共生型大肠杆菌作为一个可能的耐药基因储存库,在耐药基因的传播扩散方面发挥了重要作用_lj.目前,国内外已有大量关于猪源和牛源大肠杆菌耐药性的调查研究,但少有猪源和牛源共生大肠杆菌耐药性调查和比较研究.本试验针对从东北地区采集分离到的猪源和牛源大肠杆菌进行了药物敏感性试验,
3、并对两种动物源大肠杆菌对抗菌药物的耐药率进行比较,为临床用药和抗菌药物的合理使用提供指导.1材料与方法1.1样品来源2009年从东北地区几个规模化猪场和牛场采集的健康猪和牛的粪便样品.1.2药物及培养基硫酸链霉素(STR),硫酸庆大霉素(GEN),氨苄西林(AMP)购自北京普博欣药业有限公司;氯霉素(CHL)购白广州威佳科技有限公司;恩诺沙星(ENR),环丙沙星(CIP)购自浙江国邦药业有限公司;氟苯尼考(FIR),头孢噻呋钠(CTF),头孢曲松(CRO),头孢西丁(FOX)购白中国兽医药品监察所;新霉素(NEO),阿米卡星(AMI),粘菌素(CL),三甲氧苄啶/磺胺甲基异唑(SXT)购自中国
4、药品生物制品检定所;乙酰甲喹(MEQ)购自江苏天成动物保健品公司;LB肉汤,麦收稿日期:201009—17基金项目:国家自然科学基金项目(30972218,U0631006)作者简介:姚琼芬(1986),女,硕士,从事细菌耐药性研究,E-mail:378621041@qq.corn通讯作者:刘健华,E—mail:jhliu@scau.edu.cn康凯琼脂,MH肉汤,MH琼脂购自广州海博生物制品有限公司;质控菌株大肠杆菌ATCC25922购自杭州天和微生物试剂有限公司.1.3细菌分离鉴定将样品接种于LB肉汤中,37.C恒温摇床中培养24h.然后用接种环挑取菌液划线于麦康凯琼脂上,培养16～18h
5、后,选取麦康凯琼脂上红色不透明可疑菌落进行纯化培养,再采用杭州天和微生物试剂有限公司生产的肠杆菌科细菌生化编码微量鉴定管进行鉴定.1.4药物敏感性试验药敏试验按照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的琼脂稀释法进行,同时用ATCC25922作为质控菌株.参照CLSI的标准判断耐药(R),敏感(S)或中介(I),链霉素,新霉素,粘菌素和氟苯尼考的耐药判断参考丹麦细菌耐药监测系统(DANMAP)所使用的标准_2].乙酰甲喹目前尚无判断标准,故此不统计其耐药率.2结果2.1大肠杆菌的分离鉴定共分离鉴定55株猪源大肠杆菌和88株牛源大肠杆菌.2.2两种不同动物源大肠杆菌对15种抗菌药物的耐药情况
6、55株猪源大肠杆菌对氨苄西林,链霉素,氯霉素,环丙沙星,恩诺沙星,三甲氧苄啶/磺胺甲基异惩唑的耐药率均达到了8O以上,尤其对三甲氧苄啶/磺胺甲基异唑的耐药率达到98.2,对庆大霉素,新霉素的耐药率也较高,分别为61.99/5和74.5%,对阿米卡星的耐药率为30.9,对氟苯尼考的耐药率为61.8,对粘菌素的耐药率为21.8%,对头孢菌素类药物的耐药率比较低,为1.8～14.4.88株牛源大肠杆菌对这15种药物除三甲氧苄啶/磺胺甲基异口恶唑的耐药率为47.7%外,对其他的抗菌药物的耐药率均低于36.0Vo.55株猪源大肠杆菌对氨基糖苷类和氯霉素类药物的MIC..都大于128g/mL,对氨苄西林,
7、恩诺沙星,乙酰甲喹的MIC..也达到了128ptg/mL,对其他药物的MIC..均小于64~g/mL.88株牛源大肠杆菌除对氨苄西林和链霉素的MIC..达到128g/mL外,对其他药物的MIC.均小于或等于32g/mI(表1).2.3两种动物源大肠杆菌的耐药性对比猪源大中国兽医杂志2011年(第47卷)第8期33肠杆菌和牛源大肠杆菌对抗菌药物的耐药性除头孢菌素类药物相差不大外,对氨苄西林,氨基糖苷
