尿微量白蛋白测定在2型糖尿病的应用

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1、尿微量白蛋白测定在2型糖尿病的应用【关键词】尿微量白蛋白；2型糖尿病；时间分辨荧光免疫分析　　［摘要］目的：通过检测2型糖尿病患者尿微量白蛋白(mALB)的水平，探讨早期诊断糖尿病肾损伤的方法。方法：用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测尿微量白蛋白，苦味酸法检测尿中肌酐。结果：2型糖尿病尿蛋白阴性患者尿微量白蛋白与正常对照组比较，差异有显著性(P<0.01)。结论：用时间分辨荧光免疫分析法检测尿微量白蛋白是诊断2型糖尿病早期肾损伤可靠、灵敏的生化指标。　　［关键词］尿微量白蛋白；2型糖尿病；时间分辨荧光免疫分析5　　糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性并发症之一，在患者尚未出现

2、尿蛋白之前对其进行早期诊断和采取有效的治疗与监控，可以有效的预防糖尿病并发症的发生和发展［1］。目前肾损伤诊断多以尿素氮、肌酐、尿蛋白作为检测指标，但这些指标难以发现早期肾损伤，上述指标正常时，其中有相当比例的2型糖尿病患者已发生微量白蛋白尿，这种潜在的肾损伤过去难以早期发现，往往错过早期治疗时机。近几年人们对尿微量白蛋白检测有了深入的认识，被称为20世纪80年代对糖尿病学的两大贡献之一。检测有放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫比浊法等。本文以时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测2型糖尿病尿尿蛋白阴性患者尿微量白蛋白。报告如下。　　1材料和方法　　1．1仪器

3、与方法　　尿微量白蛋白测定用时间分辨荧光免疫分析法配套试剂，苏州新波生物有限公司提供，在上海新波ANYTEST2000时间分辨荧光免疫检测分析仪上测定，按说明书严格操作。尿肌酐测定采用苦味酸法，试剂盒购于中生北控公司。仪器应用荷兰威图SLACTRA2全自动生化分析仪。尿标本预先用生理盐水30倍稀释测定。尿蛋白定性用长春迪瑞H10尿液分析仪及配套试纸条，所有试剂按规定储藏，在有效期内使用，严格按说明书操作。　　1．2对象　　对照组60例(男33例，女27例)，平均年龄45．2岁(28岁~62岁)，为健康体检者，均排除高血压、糖尿病及其他和肾病有关病史。2型糖尿病组52例(男28例，女2

4、4例)，选自我院门诊及住院患者，均符合WHO诊断标准，平均年龄48岁(20岁~72岁)，病程2a~21a。尿常规分析蛋白定性均为阴性。5　　1.3标本　　对照组、患者组均留取新鲜晨尿测定微量白蛋白及肌酐，以微量白蛋白(μg/ml)、微量白蛋白／肌酐比值(mg/g)报告，所有标本均先离心后当日测定。　　2结果与讨论　　2．1计算尿微量白蛋白正常值　　以尿微量白蛋白mALB计算，范围1．50μg／ml～26．3μg／ml，均值14．7μg／ml。以微量白蛋白肌酐比值mALB/Cr(mg/g)计算，范围2．2mg／g~22．1mg／g，均值8．19mg/g;因尿白蛋白值呈非正态分布，低值无

5、临床意义，所用方法、试剂、仪器不同，参考值范围也有差别。一般在建立参考范围时以百分位数法按单侧值95％上限确定［2］。　　2．2微量尿蛋白含量　　2型糖尿病组52例糖尿病患者按尿中微量白蛋白含量分组，正常者22例，占42．3％，增高者30例，占57．7％。病程越长，尿微量白蛋白增高者所占比例越高。2型糖尿病尿蛋白阴性患者尿微量白蛋白与正常对照组间比较，采用t检验，差异有显著性(P<0．01)。结果如表1。表152型糖尿病患者尿微量白蛋白(mALB)水平与健康人的比较（略）　　测定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24h标本，但因留取困难，在实际应用上受到限制。随机尿测定是目前最常用

6、、最易行的方法。但应同时测定肌酐，因每日肌酐排除量相对恒定，可避免尿量变化对结果的影响。而晨尿影响因素小，结果相对比较恒定。　　　近年来，尿微量白蛋白测定已成为早期肾损伤监测和追踪的重要生化指标［2~4］，用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测尿微量白蛋白，与其他方法一样，对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验。用时间分辨荧光免疫分析法检测尿微量白蛋白是诊断2型糖尿病早期肾损伤可靠、灵敏的生化指标。　　尿微量白蛋白排出量受人的体位、运动、血压、蛋白摄入量的影响，发热、精神紧张可使尿微量白蛋白分泌增加；某些药物可通过生物学影响使尿排出尿微量白蛋白增加。实验时要考虑到各种影响

7、因素。尽量建立一个干净无尘的实验室环境。不要混用不同批号的试剂，不要使用过期试剂。使用前，实验缓冲液、待测标本和微孔反应板必须恢复到室温。吸取增强液或铕标记物时，请使用专用吸头，以避免尘土污染。使用医用蒸馏水或去离子水配制洗液，并混匀。使用干净的一次性容器配制铕标记物，应避免铕标记物稀释液进入铕标记物原液中。同时应建立自己的实验参考值范围。5　　参考文献：　　［1］LotharT.Clinicallaboratorydiagnostics［M］．Germa