川芎嗪对严重烧伤大鼠心肌细胞grp94表达的影响

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1、川芎嗪对严重烧伤大鼠心肌细胞GRP94表达的影响作者：王侃，涂硕，万慧芳，余乐涵，李华，李国辉，万福生【摘要】目的观察严重烧伤大鼠心肌细胞内质网应激蛋白表达的改变及川芎嗪对其的影响，探讨川芎嗪对严重烧伤后心肌损伤保护作用机制。方法建立大鼠30%Ⅲ度烫伤模型，酶联免疫法检测血浆中心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量，放射免疫法检测血浆中TNF-α的含量，RT-PCR和免疫组化分析GRP94的表达。结果烧伤组大鼠伤后3h血浆中cTnT含量即呈显著升高(P<0.01)，心肌中GRP94mRNA和蛋白表达于烧伤后3h显著性升高，12h达峰值，24h还

2、显著升高;Caspase-3活性在伤后3h升高，12h达高峰，48h后仍显著高于对照组。川芎嗪治疗组GRP94的表达和Caspase-3活性较烧伤组均有显著性降低(P<0.05)。结论严重烧伤可引起心肌细胞内GRP94表达呈持续性升高，川芎嗪对烧伤后早期GRP94表达升高有较好的拮抗作用。【关键词】烧伤;川芎嗪;葡萄糖调节蛋白;心肌损伤;内质网应激　Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsofliqustazineonexpressionchangeofglucose-regulatedprotein9

3、4(GRP94)inthecardiomyocytesofsevereburnrats.MethodsHealthyadult10Wistarratswererandomlydividedintothecontrolgroup(withoutburns)，theburngroup(subjectedto30%TBSAIIIdegreescalding)andthetreatmentgroup(treatedwithintraperitonealinjectionofLiqustazine(20mg/kg)immediatelyaftersca

4、ldinjury).Themyocardialtissuesampleswereharvestedat1，3，6，12and24hourspostburn(PBH).ThecardiactroponinT(cTnT)andtumornecrosisfactoralpha(TNF-α)contentsinplasmaweremeasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassaymethod(ELISA)andradioimmunoassay(RIA)respectively，RT-PCRandimmunohistoch

5、emistrywereappliedtomonitorthegeneexpressionofGRP94.ResultsthecontentofcTnTinplasmawassignificantlyincreased3hourspostburn(P<0.01)，thegeneexpressionofGRP94andcaspase-3activity3hourspostburnreachedthepeakafter12h，whiletheGRP94expressioninLiqustazinetreatmentgroupwasdramat

6、icallydecreased.ConclusionSevereburncaninduceGRP94expressionincreaseinratcardiomyocytes，LiqustazinehasnotableinhibitoryeffectsonGRP94expressionincreaseinthecardiomyocytesduringtheearlystageofpostburn.　　Keywords：Burns;Liqustazine;Glucose-regulatedprotein;Myocardialinjury;End

7、oplasmicreticulumstress10　　有研究表明内质网应激(endoplasmicreticulumstress，ERS)参与了脑缺血再灌注损伤，缺血(氧)、缺氧复氧可诱导心肌细胞内质网应激[1～3]，但严重烧伤早期是否会诱导心肌细胞发生内质网应激，以及内质网应激在严重烧伤后心肌损伤的作用特点少见报道[4]。本研究利用30%TBSAⅢ度烫伤动物模型，旨在观察严重烧伤大鼠心肌细胞内质网葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulatedprotein94，GRP94)的表达变化，探讨严重烧伤后心肌损伤与内质网应激反应的关系及川

8、芎嗪(tetramethylpyraxine，TMP)对其的影响。　　1材料和方法　　1.1动物分组及烧伤模型制作[5]选健康成年Wistar大鼠(南昌大学实验动物