先天性巨结肠肌间神经丛neurexin和neuroligin蛋白的表达及意义

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1、先天性巨结肠肌间神经丛neurexin和neuroligin蛋白的表达及意义作者：王健　张文同　孙大庆　刘春喜　李爱武【摘要】目的：观察先天性巨结肠肌间神经丛neurexin、neuroligin蛋白在狭窄段、移行段及扩张段的表达及意义。方法：将20例先天性巨结肠狭窄段、移行段和扩张段制备成肌间神经丛铺片标本，采用免疫组织化学技术，对neurexin、neuroligin蛋白进行检测。结果：neurexin、neuroligin蛋白在扩张段表达最多，移行段明显减少，狭窄段无表达（P<0.05）；同一组织neurexin蛋白和neurolig

2、in蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：neurexin、neuroligin蛋白在人体肠神经系统肌间神经丛中表达的减少及缺失是导致先天性巨结肠肠蠕动功能丧失的重要原因。【关键词】Hirschsprung病·neurexin蛋白·neuroligin蛋白·神经传导　　【ABSTRACT】Objective:Tostudytheexpressionsofneurexinandneuroliginproteininthein　testinalauerbachplexusincongenitalmegacolon,andtodisc

3、ussthesignificanceoftheexpressions.Methods:Theexpressionsoftheneurexinproteinandneuroliginproteininthemyentericnerveplexusin920caseswithcongenitalmegacolonweredetectedbyimmunohistochemistry（PolymerDetectionSystem）.Results:Neurexinproteinandneuroliginproteinwereconspicuouslyex

4、pressedintheganglioniccolonicsegmentinpatientswithcongenitalmegacolon.Intheaganglioniccolonicsegmentneurexinproteinandneuroliginproteinwerenotfound.Theywereexpressedrarelyinthetransitionzone,whereganglioncellappearedsporadically（P<0.05）.Inthesametissue,thedifferenceoftheex

5、pressionsofthetwoproteinwasnotstatisticallysignificant.Conclution:Thelossandreductionofneurexinprotein,neuroliginproteininmyentericnerveplexusisanimportantcauseofenterokinesiaincongenitalmegacolon.　　【KEYWORDS】Congenitalmegacolon·Neurexinprotein·Neuroliginprotein·Neuralconduct

6、ion　　　　肠神经系统（entericnervoussystem，ENS）是一个复杂而活跃的胃肠道动力和感觉系统，决定肠道的行为［1］。先天性巨结肠是ENS早期发生基因突变的结果［2］。neurexin是突触前跨膜蛋白，neuroligin是突触后跨膜蛋白［3］，均对中枢神经系统突触的形成起重要作用。ENS和中枢神经系统（centralnevous9system，CNS）关系密切，本研究使用肠神经铺片技术以及免疫组织化学方法，对先天性巨结肠患儿ENS中neurexin蛋白和neuroligin蛋白的表达及其意义进行探讨。　　1　资料与方法　　1

7、.1　一般资料　　　本组20例标本来自山东大学齐鲁医院小儿外科2008年6月—2009年6月临床和病理诊断为先天性巨结肠症的患儿，病理资料完整。男12例，女8例，年龄28d～6岁。短段型4例，普通型13例，长段型3例。术后病理报告证实，根治术切除的结肠近端肠壁均可检测到神经节细胞。以狭窄段为无神经细胞段，移行段为有神经细胞段，扩张段为神经细胞正常段进行对照研究。neurexin蛋白、neuroligin蛋白抗体均为SANTA生物公司提供，二抗及二步法试剂盒由北京中杉金桥生物公司提供。　　1.2　方法　　1.2.1　制备肠神经铺片标本　9　　每例新

8、鲜标本取手术后切除肠段的狭窄段、移行段及扩张段各一份，用含有肌松剂（nicardipine，10-6M，Sigma）的PBS冲洗并浸泡3