假凝集引起配血困难2例

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1、假凝集引起配血困难2例【关键词】输血;血清;血型鉴定和交叉配血  1病例介绍  病例1:患者男,77岁,因“胆石症”于200809月入院准备手术。术前检查:体温:37.2℃,脉搏:86次/min,血压:120/80mmHg,Hb89g/L,RBC2.2×1012/L,WBC3.0×109/L,PLT93×109/L,血型:O型RhD(+),心肺及肝肾功能正常。无输血史。术前备血时,交叉配血微柱凝胶法主侧凝集而送检。  病例2:患者男,78岁,因脑梗及贫血入院治疗。曾输血5次,入院检查:精神面貌差,面色苍白,呈贫血貌,血压90/60mmHg,Hb

2、71g/L,RBC1.8×1012/L,WBC2.1×109/L,PLT71×109/L,血型:O型RhD(+)。准备输血,交叉配血微柱凝胶法主侧凝集而送检。  2血型血清学检测  2.1试剂与方法抗A抗B、抗5D来自长春博德公司生物技术有限责任公司,批号分别为:20080406及1745080。抗IgG人球蛋白试剂、凝聚胺(Polybrene)试剂及抗体筛选细胞均来自于上海血液生物医药有限责任公司,批号分别为20080201、20070515、20080610。所有试验均采用经典试管法。ABO血型检测用常规的正反定型方法,RhD血型用盐水

3、法,抗体筛查和交叉配血均使用盐水介质法、抗人球蛋白试验、凝聚胺试验三种技术方法进行操作[1]。  2.2血型鉴定患者的血型均为O型RhD(+)  2.3患者血清中血型抗体筛查结果见表1。表1红细胞血型抗体筛查结果注:表1后面三列为患者血清用红细胞血型抗体筛选细胞筛选后的结果,分别是盐水介质、凝聚胺及抗人球三种方法,两患者抗体筛查实验结果相同,均为表1中的结果。  2.4患者交叉配血反应结果见表2。表2患者交叉配血反应结果  2.5假凝集检测和输血处理5  将上述试验中有凝集的反应液涂在洁净载玻片上,放显微镜下(40倍)观察,视野中可见游离的细胞及

4、缗钱状凝集或小凝块,加一滴生理盐水轻轻晃动载玻片,然后重新放显微镜下观察,凝块消失,视野中均为完整游离的红细胞;在有凝集的反应管中加入4滴生理盐水轻轻晃动,取一滴涂在载玻片上,放显微镜下观察,视野中均为完整游离的细胞,可知凝集为假凝集,且只在盐水介质中出现。经与临床沟通,给予该两患者缓慢输注各4单位悬浮红细胞并及时补充生理盐水,输注过程中密切观察患者反应,无输血不良反应,反馈输注后效果良好。  3讨论  在交叉配血的日常实验中,常可出现一些配血不合的现象,主要原因有:(1)同种抗体和/或自身抗体的存在;(2)疾病或个体差异造成的假凝集;(3)实验

5、者的操作不当造成的假凝集,如离心力不适合、红细胞的不正确洗涤或悬浮等;(3)室温过高、过低或水浴箱温度不正确等环境条件的不适合造成的凝集;(4)血清中含有有活性的补体造成溶血等,可根据血型抗体筛查结果、直接抗人球试验或者自身对照等实验的结果判断是哪种情况造成的配血不相合,然后采取不同的解决措施。  盐水直接凝集试验交叉配血相容只是表示IgM类抗体和相应红细胞抗原相容,主要是ABO血型抗体[2]。本试验交叉配血时只有盐水介质出现凝集,而红细胞血型抗体筛查细胞反应结果也只有盐水介质出现凝集,对照红细胞血型抗体筛选细胞反应格局表,可以排除同种抗体的存在

6、。  冷反应性自身抗体也能引起难以确定的阳性反应,在血型定型、抗体鉴定、交叉配血时出现问题,最常见的冷抗体是特异性的抗Ⅰ,在37℃5保温时反应性消失,在交叉配血时出现难以确定的阳性反应时要判断是不是冷抗体引起的。根据该实验结果,交叉配血时凝集强度不随温度变化,排除冷抗体的可能。  该两病例交叉配血不合的原因应该为患者血清中蛋白质浓度的异常而引起的,因为某些疾病可以造成患者血清中某些蛋白(多为球蛋白)或纤维蛋白原异常升高,造成红细胞的聚合,显微镜下显示为缗钱状凝集,缗钱状凝集的形成一般只在盐水介质中存在,不影响抗人球蛋白试验,因为在加入抗人球蛋白

7、试剂前,由于经过洗涤,血清中能引起这种现象的蛋白质已被去除。  假凝集等配血困难往往涉及到医院输血科的质量管理,这方面应由管理层建立科学的管理体系及相关操作规程,规范每一位工作人员的操作,在交叉配血的实验中,根据不同的试验结果,对照患者的临床病症,区别对待,灵活掌握,切实解决急需输血患者的输血困难问题,确保输血安全和质量。  安全输血的理念越来越深入人心,对于血液的开发研究也上了新的台阶,比如红细胞代用品的研究和开发已经取得一定的成果[3],另外通用O型全血也正在研究中[4],现代科学的进展必将逐步减少或消除因为交叉配血困难而引起的输血障碍,提高

8、输血的效率和安全性。【参考文献】  1刘达庄主编.免疫血液学[M].上海科学技术出版社,2002.1905201  2李勇,杨贵贞主编

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