丹参酮iia对大鼠肺缺血再灌注损伤细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

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1、丹参酮IIA对大鼠肺缺血再灌注损伤细胞凋亡及相关蛋白表达的影响【摘要】目的研究丹参酮IIA对大鼠肺缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡以及相关蛋白表达的干预作用。方法健康SD大鼠60只随机分成四组，除对照组外，均建立肺缺血再灌注模型，其中两组分别加丹参酮IIA和生理盐水干预，检测肺组织湿/干重比、细胞凋亡率、Bcl2及Caspase3的表达等指标。结果肺缺血再灌注组与对照组相比，肺组织湿/干重比明显增高，流式细胞仪检测出现大量的凋亡细胞，证明该模型制备是成功的;肺缺血再灌注组显示有统计学意义的凋亡，Bcl2降低和C

2、aspase3增高与对照组比较有统计学意义;丹参酮组与未干预组和生理盐水组比较，Bcl2增高和Caspase3降低均有统计学意义。结论丹参酮能够改善由肺缺血再灌注引起的细胞凋亡，其机制可能与丹参酮能干预肺组织Bcl2和Caspase3蛋白的表达有关。【关键词】肺;缺血再灌注;凋亡;Bcl2;Caspase3;丹参酮　　ABSTRACT：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofTanshinoneonapoptosisandtherelatedproteinsduringl

3、ungischemiareperfusioninjury(LIRI)ofrats.MethodsSixtyratswererandomlydividedintofourgroups.ApoptoticcellsinlungtissuewasinspectedbyflowcytometryandHematoxylinandEosin9staining,andtheexpressionofBcl2andcaspase3wasdetectedbyRTPCRandwesternblot.ResultsCompare

4、dwithnormalcontrolgroup,apoptoticcellsandtheexpressionofBcl2andCaspase3inLIRImodelgroupweremarkedlyincreased(P<0.01).Comparedwithmodelgroup,tanshinonecouldsignificantlyinhibitecellapoptosisandtheexpressionofapoptosisrelatedproteinsinlungtissues(P<0.0

5、5).ConclusionTanshinonecanprotectlungfromischemiareperfusioninjurybymodulatingtheexpressionofapoptosisrelatedproteinsBcl2andCaspase3.　　KEYWORDS:Lung;Ischemiareferfysioninjury;Apoptosis;Bcl2;Caspase3;Tanshinone　　肺缺血再灌注损伤(lungischemiareperfusioninjury，LIRI

6、)过程中细胞凋亡过度是导致肺损伤的重要原因之一，凋亡作为LIRI的早期事件，参与了LIRI的病理生理过程[1,2]。丹参酮IIA因其具有毒副作用小、“多靶效应”等特点而广泛应用于临床，尤其在防治缺血再灌注(ischemiareperfusion，IR)损伤方面，具有明显的保护作用[3]。本实验首先建立大鼠肺IR模型，然后观察丹参酮IIA对LIRI后肺组织Bcl2、Caspase3表达和细胞凋亡的影响，探讨丹参酮IIA对LIRI中细胞凋亡的保护作用及其可能机制。9　　1材料与方法　　1.1实验动物分组　　成年雄

7、性健康SD大鼠(湖北省实验动物中心提供)60只，体质量300±25g。随机分为正常对照组(A组，n=6)，除不作缺血处理外，余同其它组;肺缺血再灌注组(B组，n=18);缺血再灌注加生理盐水组(C组，n=18)，腹腔注射生理盐水，缺血1h，再灌3h;肺缺血再灌注加丹参酮组(D组，n=18)，腹腔注射丹参酮，剂量为15mg/kg,缺血1h，再灌3h。B、C、D每组又分为三个亚组，再灌时间分别为1h、2h、3h，每个亚组6只大鼠。　　1.2大鼠肺缺血再灌注模型的建立　　实验模型的制备采用Eppinger方法，参考Se

8、kido等模型[4]。取健康SD大鼠，20%水合氯醛(300～350)mg/kg腹腔注射麻醉后，仰卧位固定。行颈部正中切口，分离出气管、右侧颈静脉和颈动脉，气管切开、插管，接动物呼吸机行机械通气(吸入室内空气，呼吸频率40次，潮气量10ml/kg，吸呼比为1∶92)，右侧颈静脉插管、固定，接微量注射泵;然后经左侧第5肋间开胸，游离左肺门，静脉注射肝素100U。静息5min