中药治疗类风湿性关节炎配伍规律的实验研究

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1、中药治疗类风湿性关节炎配伍规律的实验研究作者：姜旭光，姜明霞，孙永显，荆雪宁，张新鹃，杨乔【摘要】目的探讨临床治疗类风湿性关节炎(RA)使用频率高的解表药、祛风湿药、活血药及其复方对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗效果、作用机制以及在复方合剂中发挥主要作用的药物。方法造模佐剂性关节炎大鼠，各组给予不同的药物合剂灌胃治疗，观察继发侧足爪肿胀度;22d后，检测足爪浸液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、前列腺素(PGE2)水平。结果复方合剂、地塞米松、祛风湿合剂、解表合剂、活血合剂对AA大鼠均有治疗作用。复方合剂、地塞米松、祛风湿合剂作用最强，且它们足

2、爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2水平都明显低于模型组。结论复方合剂能明显抑制AA大鼠足爪肿胀，祛风湿合剂在复方合剂中可能发挥主要的治疗作用。作用机制可能都是通过抑制炎性因子TNF-α，IL-1β，PGE2水平表达。【关键词】类风湿性关节炎;佐剂性关节炎;配伍规律;作用机制　　中医对类风湿性关节炎(rheujmatoid9arthritis，RA)的治疗积累了丰富的临床经验，但系统性、科学性不足。祛风除湿，活血解表是该类复方常用的配伍规律。为探讨中药治疗RA的配伍规律，我们选取在治疗类风湿性关节炎临床使用频率最高的解表药(麻黄)、祛风湿药(川乌)、活血药(当归)作为

3、研究对象[1]。为增强药物的疗效，我们将上述药物配伍成药对合剂：解表合剂(麻黄-桂枝)、祛风湿合剂(川乌-草乌)、活血合剂(当归-川芎)、复方合剂(上述药物配伍而成)。通过给患有佐剂性关节炎(AdjuvantArthritis，AA)的Wistar大鼠灌胃不同的药对合剂或复方合剂，观察大鼠继发侧足爪肿胀体积、足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2水平，分析治疗效果、作用机制及发挥主要作用的药对组等。　　1材料　　1.1动物与分组健康SPF级Wistar雄性大鼠(合格证号：SCXK鲁20080004)84只，体质量(250±50)g，购自山东大学实验动物中心，饲养1周后

4、，随机数字法分为7组，每组12只，即正常对照组(N)、模型组(M)、地塞米松组(D)、复方组(FF)、祛风湿组(QFS)、解表组(JB)、活血组(HX)。　　1.2试剂与药物　　1.2.1试剂卡介苗80mg/ml(北京生物制品研究所2008040801)，不完全弗氏佐剂(Sigma公司);大鼠TNF-αELISA试剂盒、大鼠IL-1βELISA试剂盒、大鼠PGE2ELISA试剂盒(赛尔斯生物制品公司);自治足爪容积测量仪;ThermoMultiskan9MK3酶标仪(北京惠安泽泰科技有限公司)。　　1.2.2药物及制法中药麻黄、桂枝、制川乌、制草乌、当归、川芎购自莱阳市

5、江波大药房，由山东中医药高等专科学校中药鉴定教研室鉴定全部合格。醋酸地塞米松片，国药准字H20055075，青岛国风高科技药业股份有限公司产品。　　解表合剂由麻黄与桂枝按1∶1组合，制成生药含量1g/ml的水煎液;祛风湿合剂由制川乌与制草乌按1∶1组合，制成生药含量0.35g/ml的水煎液;活血合剂由当归与川芎按3∶2组合，制成生药含量1.4g/ml的水煎液;复方合剂由麻黄、桂枝、制川乌、制草乌、当归、川芎按3∶3∶1∶1∶4∶2比例组成，制成生药含量2.7g/ml的水煎液;以上各组合剂水煎液在本校药剂实验室完成。地塞米松在灌胃前制成浓度为0.125mg/ml溶液。　　

6、2方法　　2.1模型制备参考文献，正常对照组每只大鼠左侧足爪皮内注射生理盐水0.1ml，其余每组每只大鼠左侧足爪皮内注射卡介苗浓度为10mg的CFA0.1ml，制备佐剂性关节炎大鼠模型[2]。　　2.2给药方法9AA大鼠从注射CFA当天开始给药，各组大鼠给予不同的药物，给药方法灌胃。药量参按动物的体表面积折算大鼠用量：大鼠药用量(g/kg)=人的药用量×0.018×5。人的药用量参照田代华主编《实用中药辞典》[3]，地塞米松片的用量参考药物说明书。本实验中大鼠药实际投药量5倍于计算所得大鼠用药量。即：大鼠实际用量(g/kg)=大鼠用药量(g/kg)×5，经计算可得，正常

7、组给予灌胃蒸馏水4ml/d，模型组灌胃等量蒸馏水，地塞米松组灌胃地塞米松悬浊液0.5mg/(kg·d)，祛风湿组灌胃川草乌合剂1.4g/(kg·d)，活血组灌胃归芎合剂5.6g/(kg·d)，解表组灌胃麻桂合剂4.0g/(kg·d)，复方组灌胃复方合剂10.8g/(kg·d)。给药时间22d。　　2.3指标检测　　2.3.1足爪肿胀体积的测量用自制的大鼠足爪容积测量仪，于第11天开始隔日测右足爪容积。按下述公式计算足爪肿胀度：S(%)=(BV-AV)/AV×100%。注：S为足爪肿胀度，AV注射佐剂前的容积，BV注射佐剂后的容积。　　2.