p53、vegf、tsp1在良性前列腺增生症及前列腺癌患者前列腺组织中的表达及意义

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1、p53、VEGF、TSP1在良性前列腺增生症及前列腺癌患者前列腺组织中的表达及意义【摘要】目的探讨p53基因、血管内皮生长因子(VEGF)、凝血酶敏感蛋白1(TSP1)在良性前列腺增生症(BPH)及前列腺癌(Pca)患者前列腺组织中的表达及意义。方法BPH患者20例，Pca患者80例。Pca组Gleason评分<7者为低评分组46例,Gleason评分≥7者为高评分组34例;无骨转移者59例，有骨转移者21例。运用免疫组化二步法检测各组中p53、VEGF、TSP1的表达水平。结果Pca组中p53、VEGF的表达明显高于BPH组(P<0.05)，BP

2、H组中TSP1的表达明显高于Pca组(P<0.05);Pca中低评分组、无骨转移组p53、VEGF的表达分别明显低于高评分组、骨转移组(P<0.05);低评分组、无骨转移组TSP1的表达分别明显高于高评分组、骨转移组(P<0.05)。Pca组中p53与VEGF的表达呈正相关，p53与TSP1的表达呈负相关。结论在PCa中p53抑癌基因突变，可能上调VEGF和下调TSP1，抑制肿瘤血管的生成，p53、VEGF和TSP1是PCa恶性程度和预后判断的重要指标。【关键词】前列腺癌;良性前列腺增生;p53;血管内皮生长因子;凝血酶敏感蛋白18前列腺

3、癌(Pca)是西方国家男性最常见的恶性肿瘤。目前在我国PCa发病率增高，严重危害男性健康。血管形成是促进肿瘤生长、增殖、转移的重要性因素，p53是重要的肿瘤抑制基因，与人类多种肿瘤的发生、发展有着密切的关系。Visakorpi等〔1〕认为，在PCa中p53的高表达与高病理分级、高细胞增生率相关，高水平的p53免疫染色是PCa预后最好的预测因子之一，且与12倍的死亡率相关。血管内皮生长因子(VEGF)、凝血酶敏感蛋白1(TSP1)是重要的血管生成调节因子。Dameron等〔2〕报道野生型p53通过上调TSP1的合成而抑制血管生成。我们采用免疫组织化学方法检测良性前

4、列腺增生症(BPH)及PCa组织中p53、VEGF、TSP1的表达情况，探讨p53、VEGF、TSP1在PCa中作用。　　1材料与方法　　1.1材料我院2000～2006年期间BPH标本20例，PCa标本80例,所有标本均有病理诊断。患者年龄52～91(平均70)岁。BPH患者中经耻骨上前列腺切除术8例，经TURP术12例;PCa患者中经根治术11例，经直肠前列腺穿刺术20例，经TURP术49例。PCa根据Gleason分级，Gleason评分<7为低评分组(46例);Gleason评分≥7为高评分组(34例)，根据有无骨转移分为无骨转移组(59例)和有骨转

5、移组(21例)。所有标本经10%甲醛固定12～24h后常规石蜡包埋，每例标本制4μm切片4张分别检测p53、VEGF、TSP1及HE染色。　　1.2试剂来源与工作浓度8一抗均为鼠抗人单克隆抗体，其中p53、VEGF抗体购自北京中杉生物技术公司，p53、VEGF为工作液。TSP1原液购自SANTACRUZ生物技术公司，工作浓度为1∶50。PoverVision二步法免疫组化检测试剂盒、DAB染色剂购自北京中杉生物技术公司。　　1.3免疫组化运用二步法免疫组化检测法，染色步骤按照试剂说明书进行，DAB染色。公司提供的阳性对照片为阳性对照，以PBS代替一抗为阴性对照。　

6、　1.4结果判定p53标记结果判定：根据细胞核染色强度及阳性细胞数占前列腺上皮数的百分率分为：(-):无阳性细胞或阳性细胞数比例小于10%;(+):细胞核染色呈棕色或淡棕色且阳性细胞数比例大于10%。VEGF标记结果判定：根据胞质染色强度及阳性细胞数占前列腺上皮数的百分率分为：(-):无阳性细胞或阳性细胞数比例小于10%;(+):细胞质染色呈棕色或淡棕色且阳性细胞数比例大于10%。TSP1标记结果判定：根据胞质染色强度及阳性细胞数占前列腺上皮数的百分率分为：(-):无阳性细胞或阳性细胞数比例小于10%;(+):细胞质染色呈棕色或淡棕色且阳性细胞数比例大于10%。　　

7、1.5统计学方法计数资料运用JMTJEX软件进行χ2检验和相关分析。8　　2结果　　2.1各组p53、VEGF及TSP1表达情况p53的阳性表达位于前列腺腺上皮、PCa细胞的胞核中,呈棕褐色。VEGF的阳性表达位于前列腺腺上皮、PCa细胞的胞浆中，呈棕黄色，TSP1的阳性表达位于前列腺上皮、PCa细胞质中，呈棕黄色，见图1。Pca组中p53、VEGF的表达显著高于BPH组(P<0.05),在Pca组中高评分组中p53、VEGF的表达显著高于低评分组中(P<0.05),有骨转移组p53、VEGF的表达显著高于无骨转移组(P<0.0