细菌的染色方法和细胞形态结构的观察

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1、实验二细菌的染色方法和细胞形态结构的观察姓名:马天柔学号:120109112日期:2014/03/30一·目的:1了解生物染色的一般知识。2学习细菌的涂片,染色的基本技术,并掌握细菌的简单染色方法和革兰氏染色法。3通过染色观察细菌细胞的形态和结构。二·染色的一般知识:细菌个体不仅十分微小,而且是无色半透明的,在明视野显微镜下很难看的清楚。因此,要借助不同的染色方法,使细菌细胞或某些结构着色,与背景形成明显反差。染色的标本不仅在显微镜下易于观察,还有鉴别细菌不同的细胞结构的作用。三·细菌的革兰氏染色法(

2、一)1器材:显微镜,酒精灯,载玻片,镊子,接种耳,蒸馏水,香柏油,酒精,火柴,吸水纸,擦镜纸。2结晶紫染色液,碘液,95%酒精,番红染色液。3大肠杆菌,金黄色葡萄球菌。(二)步骤:涂片-干燥-固定-结晶紫染色1min-水洗-碘液煤染1min-水洗-95%酒精脱色20-30s-番红染色4-5min-水洗-干燥-镜检1涂片:用镊子取浸泡在酒精中干净的载玻片,烧去酒精,在玻片中央加一滴清水,通过无菌操作方法从斜面上分别挑取大肠杆菌和金黄色葡萄球菌和清水滴混合均匀。2干燥:涂片可让其在室温下干燥,必要时可将涂

3、片朝上,小心的在酒精灯火焰高处稍烘,以助水分蒸发,快速干燥。但切勿靠近火焰,将标本烤焦。3固定:一般常采用加热固定法,即手持玻片一端,涂片朝上,在火焰外层通过3-4次,以玻片反面触及皮肤不觉得太烫为度。待冷却后,在进行染色。4染色:待固定涂片完全冷却后,在涂面上滴加染色液,染色液要布满整个涂面。5水洗:染色时间到后,倾去染色液,斜置载玻片,用干净的细流水冲去多余的染料。6干燥:用吸水纸吸取玻片上的水分,让其自然干燥。7镜检:用油镜观察,并记录观察结果。油镜下观察的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌(100×10

4、)四·心得体会:老师看了我染色后的标本后说班里的第一个模板出来了,心里是很高兴的,我按照步骤一步步染色,还算是染的均匀。不足的是可能大肠杆菌在染色布到位,红色的部分不是很清楚,可能是取样本的时候没有到位,下次要均匀取样本。

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