《免疫诊断》知识点总结

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1、《免疫诊断》一．概述1.抗原抗体结合反应的特点——血清学试验或血清学反应：(1)具有特异性：抗原的表位与抗体的抗原结合点结构互补(2)可逆性结合(3)具有可见性：抗原与相应抗体结合后能肉眼直接观察(4)抗原抗体比例对反应现象的影响2.抗原抗体结合反应的条件(1)温度：最适温度为37℃(2)酸碱度：最适pH6-8(3)电解质:可促进抗原与抗体的结合，常用生理盐水二．抗原或抗体的检测方法(一)凝集反应：1.概述：颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合，出现肉眼可见团块状凝集物的现象叫做凝集反应。凝集反应颗粒性抗原

2、：细菌、红细胞等，肉眼观悬浊液，显微镜下有一定形态；沉淀反应可溶性抗原：如蛋白质、多糖等，肉眼观澄清透明，显微镜下看不到其形态；2.直接凝集试验：将己知的颗粒性抗原(或抗体)与未知抗体(或抗原)直接进行反应而出现肉眼可见团块状凝集物的试验。（1）玻片凝集试验：已知抗体测抗原——用于血型检查、细菌鉴定和分型等（2）试管直接凝集试验：已知抗原定量测抗体——如肥达氏反应3.间接凝集反应：可溶性抗原吸附于载体颗粒(乳胶颗粒、红细胞等)制成免疫微球或致敏载体颗粒，然后再与相应抗体进行反应而出现载体颗粒凝集的现象。——本法常

3、用于检测类风湿因子、抗Rh抗体等。（Notice：如将抗体包被在载体上称反向间接凝集试验）4.间接凝集抑制反应：将可溶性抗原先与相应抗体混合，然后再加入抗原致敏的载体颗粒，由于抗体已与可溶性抗原结合，故不能再与致敏载体颗粒发生间接凝集。（二）沉淀反应：1.概述：指可溶性抗原（细菌培养滤液、组织浸出液、血清蛋白等）与相应抗体结合，形成肉眼可见沉淀物的反应因沉淀反应多在琼脂凝胶中进行，故又称为琼脂扩散试验或免疫扩散试验。2.2.分类：单向免疫扩散试验，双向免疫扩散试验，免疫电泳，免疫比浊(三)免疫标记技术概念：指用荧

4、光素、酶、放射性同位素等标记抗体或抗原进行的抗原抗体结合反应。具有敏感、快速、能定性和/定量甚至定位等优点。1.免疫荧光法：——将荧光素与抗体结合成荧光抗体，再与待测抗原(组织切片、细胞涂片)进行结合反应，最后在荧光显微镜下观察(荧光素在紫外线的激发下可发射肉眼可见的荧光)常用荧光素：①异硫氰酸荧光素(FITC)——发黄绿色荧光②藻红蛋白(PE)——发红色荧光应用：免疫荧光法常用于检查病原微生物的抗原或抗体，也可用于免疫细胞CD分子鉴定。2.酶免疫测定：——指用酶标抗体进行的抗原抗体结合反应。同时利用了酶对底物的

5、高效催化作用以及抗原抗体的特异性结合反应。标记物：辣根过氧化物酶(HRP)碱性磷酸酶(AP)◇酶联免疫吸附试验(ELISA)：——抗原或抗体包被在固相上(聚苯乙烯微孔板等)，然后加入酶标抗体或抗原进行反应，然后用洗涤液洗去未结合的或游离的抗原或抗体，再加入底物显色。观察有无显色反应，以对抗体或抗原进行定性、定量检测(用酶标测定仪测定光密度值)。类型：A.双抗夹心法B.间接法C.酶联免疫斑点试验（ELISPOT）D.免疫组化技术——用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原反应，结合形态学检查，对抗原进行定性、定量、定位

6、检测的技术3.放射免疫测定法(RIA)：常用标记物：125I、131I液相法、固相法应用：常用于微量物质的测定，如激素、IgE等4.化学发光免疫分析：常用标记物：吖啶酯、鲁米诺应用：常用于血清超微量活性物质的测定，如甲状腺素等的检测5.免疫印迹法(Westernblotting)：——凝胶电泳与固相免疫法结合的一种方法，常用于检测多种病毒的抗体或抗原。例如检测HIV抗体等