结晶紫中性红胆盐mug琼脂

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1、编号:022225  中文名称:结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)  英文名称:VioletRedBileAgar-MUG  用途:  用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T4789.38-2008)  原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,

2、使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。图鉴:  配方(每升):  蛋白胨7g  酵母膏粉3g  乳糖10g  氯化钠5g  3号胆盐1.5g  中性红0.03g  结晶紫0.002g  琼脂15g  MUG0.1g  最终pH7.4±0.2  使用方法:  1、称取本品41.6g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌,备用。  2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均

3、质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择2~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基,琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。  3、36±1℃培养18—24h。  4、微生物检验中观察菌落形态,并于暗室中用360nm~360nm波长紫外灯照射,计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。  质量控制:  质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下:  菌名        菌号    生长状况      培养特征  大肠埃希氏菌   ATCC25922    良好    有荧光,深红色菌落,周围有红色沉淀  产气肠杆

4、菌    CMCC(B)45103  良好    无荧光,红色菌落,周围可有淡红色沉淀  粪链球菌     CMCC32223    受抑制        -----  贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。  规格:100g

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