化学成分传统提取分离方法经验

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1、化学成分传统提取分离方法经验1.在从事研究之前一定要认真查阅与课题相关的文献资料。做到心中有数，即怎样来提取是最好的？怎样来解析植物中特征类型的化合物？别人都做了哪些方面的工作了？等等。象我的课题植物主要含有生物碱类成分，我就选择先用稀酸浸泡，再用阳离子交换树脂交换富集，就把叶绿素，多糖等杂质除掉了，同时生物碱含量也提高了，给后来的分离工作带来了很大的帮助。2.天然药物或中药一定要在做之前确定其基原（植物来源）。这很重要，不然会给文献检索带来麻烦。3.要抓重点，学会放弃。因为我觉得一个植物中的化学成分成千上百。我们不可能把它全部拿到，所以我们实验中要拿那些量稍

2、大的、容易拿的。不要上了很久的柱子，分到后面得到的量还不够打谱就不好了。你可以从最后结题剩下的几百个浸膏流份瓶子看到这一点。4.实验过程中要小心每一步，三思而后行。因为你的浸膏来之不易。往往不再给你重来的机会。5.要给自己信心，要敢于想，敢于尝试。关于柱子的尺寸应该是粗长的最好。柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用

3、粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了。现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，但没有验证过。关于湿法、干法上样湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，湿法省事，一

4、般用淋洗剂溶解样品，有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1：1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）。关于操作问题1装柱柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况

5、下有些小气泡没太大的影响，加压可以消除气泡，或者放置过夜，如果硅胶还没沉淀下来，没有上样品，可以重新用玻璃棒搅拌一下，让它重新上样。变花是由于柱子中气泡的存在，放置过夜和过快更换洗脱极性都会产生气泡。装柱子时一定要搅拌使得硅胶中的气体尽量拍干净。更换极性时，我一般从50:1到20:1是逐渐更换的，就是先到40:1，30:1在到20:1。这样更换，放热就不明显。过常压柱子时，为什么过柱过程中柱子内会有气泡，怎样避免，遇到这种情况应该怎样处理？若是硅胶柱，还没有上样的话，可以搅一搅，让其自然沉降就可以；若是已经上了样品，就只好加压赶赶气泡试试。一般过硅胶柱如何避免

6、产生气泡：1.装柱之前应搅拌均匀，然后装柱；2.装柱尽可能一次性的装完，3.过柱的时候，你是否干过柱，这也会产生气泡；4.还有你在装完柱后，最好在硅胶上方加一片圆形滤纸，加上后再加一块棉花，这样加溶剂冲洗时，可以避免冲起硅胶，产生气泡；如果气泡已经产生，可以：1.加压驱赶气泡；2.我自己也发现了一个方法，你试试，就是先不要冲洗，放置过夜，第二天早上气泡就会到了上面，不过有的时候不行。3.如果还不行，就用高极性的溶剂冲下样品，收集，重新装柱。湿法装柱要点：1.估算柱子硅胶用量2.估算溶剂与硅胶混合量3.将溶剂与硅胶于烧杯中搅拌均匀，应搅至无气泡4.用漏斗装柱，尽

7、可能一次性加完.5.反复加溶剂平衡柱子，至柱床不再下降为止。6.加样有两种方法，可溶于以上溶剂的样品，可用适量溶剂溶解后，将溶剂放平柱床后直接加样；还可用适宜溶剂溶解样品，用适量硅胶拌样，硅胶量以能分散样品即可，尽量少，以减小初始色带，加样时，柱床上留少量溶剂，加样后，应轻敲柱子样品带的四周，使气泡上移，样品带上加棉花或盖少量硅胶，防止加溶剂时冲动样品层，加好样后连续冲柱时间尽量长些，至少10小时以上，可基本消除气泡的产生。2加样。用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石

8、英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂，一开