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1、胶体金免疫层析法在尿液检查中的应用体会检验医学与临床2O1]年6月第8卷第11期LabMedClin,June2011,Vo1.8,No.11胶体金免疫层析法在尿液检查中的应用体会杨静梅,林一民△(重庆市肿瘤研究所临床检验中心400030)?1351??经验交流?【摘要】目的探讨胶体金免疫层析法(GICA)在尿液检查(下称尿检)中的应用.方法从GICA的原理,操作,结果判断及注意事项等方面分析胶体金早孕试纸在尿检中的影响因素.结果胶体金早孕试纸是通过测定尿8一人绒毛膜促性腺激素(HCG)快速诊断早孕的常用
2、临床检测手段,pHCG的升高或降低还可见于早孕之外的其他情况,应引起重视.结论胶体金早孕试纸测定尿D—HCG只能作为辅助诊断手段,需结合临床症状及其他检查才能作出准确判断.【关键词】胶体金免疫层析法;早孕;8人绒毛膜促性腺激素DOI:10.3969/j.issn.1672—9455.2011.11.041文献标志码:B文章编号:16729455(2Ol1)11—1351O2人绒毛膜促性腺激素(HCG)作为一种生殖内分泌激素,其检测正在临床实验室展开,其对于妊娠或急腹症的辅助诊断及随访都有重要作用].测定H
3、CG目前主要是用免疫学方法,应用比较多的检测方法有单克隆抗体酶免疫法,放射免疫法,化学发光法,免疫胶体金试纸法.又以胶体金免疫层析法(GICA)检测尿D一人绒毛膜促性腺激素(pHCG)应用最为广泛,因其方法简便,快捷,特异性好,灵敏度高,结果明显,对患者无损伤,污染机会少,不需仪器设备,可避免与HCG有类似结构的其他糖蛋白起交叉反应;也可作用于了解胚胎生长情况,观察病情进展和疗效;并对妊娠相关疾病的诊断,鉴别和临床观察具重要价值.本文就GICA在尿液检查(下称尿检)中的临床应用做简要分析.1材料与方法1.
4、1材料艾康早早孕检测试纸购自艾康生物技术(杭州)有限公司.1.2方法单克隆抗体胶体金免疫层析法.1.3原理胶体金双抗体夹心法金标为鼠源性抗8一HCG单克隆抗体与胶体金的复合物,测试线包被羊抗a—HCG多克隆抗体,控制线包被羊抗鼠多克隆抗体.当待测尿液或血清中含有一定量的HCG时,标本通过层析作用到达金标位置HCG的p链和单抗p—HCG发生免疫反应,再层析到测试线位置,HCG的a链和多抗"HCG发生免疫反应,这样就把金标通过HCG桥连到测试(T)线上,达到一定量后,金标显色为肉眼可见的水平,多余的金标继续泳
5、动到控制(c)线位置,由于多抗鼠和鼠源性抗口HCG单抗发生免疫反应,从而桥连胶体金显色,这样就得到阳性结果.当尿液或血清中不含HCG时,金标和测试线抗体不发生桥连,而控制线则显色,这样就得到了阴性结果.1.4检测结果阳性,阴性,弱阳性.2讨论HCG是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素,由,8亚单位组成,亚单位的氨基酸排列顺序和黄体生成素(LH),促卵泡成熟激素(FSH),促甲状腺成熟激素(TSH)的a亚单位大体相同,相互间可发生交叉反应.而B亚单位[相对分子质量(25～3O)×10.]结构特异,表现出其特有
6、的生物活性和免疫活性,不存在于其他糖蛋白激素中,根据这一特点制备的pHCG单克隆抗体,可将上述激素之间的交叉反应降低到最低值l2].现在所有的检测HCG的方法都是基于其口亚单位的独特性.通讯作者,E—mail:lyre一0001@yahoo.corn.现临床上多采用测定血和尿中的特异性HCG协助诊断早孕,也可辅助诊断如异位妊娠,滋养细胞疾病等妊娠相关疾病.胶体金免疫层析法在尿检中应注意以下几个问题.2.1阳性一般表示早期妊娠,T线(测试线)早期随HCG增高而加深.异位妊娠,生殖系统疾病如葡萄胎,恶性葡萄胎
7、,绒癌,睾丸畸胎瘤,某些癌症如支气管癌,胃癌也可分泌HCG,试纸法呈阳性.另据报道,脑垂体疾病,甲状腺机能亢进,卵巢囊肿也可致HCG阳性结果.尽管0链为HCG所特有,但与LH仍有部分交叉反应,在LH增高时,仍可假阳性,因此育龄妇女检查时应避开排卵期l3].2.2阴性一般表示非妊娠.早期妊娠因时间太短,异位妊娠可致尿液中B—HCG低于25u/r,试纸法测定p—HCG呈阴性.结合病史,临床表现,血尿HCG综合分析及影像学检查等辅助诊断,对于早期发现异位妊娠非常重要.大量饮水,服利尿剂或其他药物可使HCG含量下
8、降,引起假阴性.在葡萄胎等妊娠滋养细胞疾病的患者中,其滋养细胞高度增生,产生大量HCG,血,尿中HCG均明显增高,其浓度可达正常妊娠的100倍.过量HCG分别与试纸中胶体金标记的鼠抗人口HCG单克隆抗体和羊抗人HCG多抗血清结合,而不再形成金标记的G—HCG抗体一HCG-羊抗人HCG多抗"夹心复合物",不再出现阳性结果,此现象称"H00K"现象,即钩状效应[4].为杜绝钩状效应导致的假阴性,对于临床疑诊为葡萄胎,绒毛膜癌等滋养
