油菜品种抗病性鉴定技术规范

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1、AHPS安徽省农作物品种审定委员会技术规范PSJG1107.1-2009油菜品种抗病性鉴定技术规范（试行）2009-04-07发布2009-10-01实施安徽省农作物品种审定委员会发布安徽省农作物品种审定委员会技术规范油菜品种抗病性鉴定技术规范第1部分：菌核病抗性鉴定PSJG1107.1-2009前言《油菜品种抗病性鉴定技术规范》为系列标准。第1部分：菌核病抗性鉴定PSJG1107.1-2009本规范为PSJG1107.1-2009—菌核病抗性鉴定。本规范附录A为规范性附录。本规范由安徽省品种审定委员会提出并归口。本规范负责起草单位：安徽农业大学植物保护学院本

2、规范参加起草单位：安徽省农业科学院植物保护研究所、安徽省农业科学院作物研究所、安徽省农业科学院棉花研究所研究所、安徽省植物保护总站、安徽省种子管理总站。本规范起草人：丁克坚、程福如、张磊、王文相、檀根甲、刘家成、孔令传、赵德平。安徽省农作物品种审定委员会2009-04-07发布2009-10-01实施-1-PSJG1107.1-20091主题内容与适用范围本规范规定了油菜品种菌核病抗性鉴定技术和抗病性评价标准。本规范适用于安徽省主要农作物品种审定中油菜品种菌核病抗性鉴定和抗性评价。本规范同时适用于安徽省油菜品种区域试验、生产试验和自然诱发鉴定中的油菜菌核病病情

3、调查和抗性评价。2引用文件《油菜菌核病防治技术规程》NY/T794-2004。《农作物品种抗病性鉴定指南》PSJG1101-2009。《安徽省主要农作物品种推广应用前审定规范》（皖农种[2007]100号）。《安徽省主要农作物审定品种基本条件评审细则有关评审事项说明》（皖农种[2008]68号）。3术语和定义3.1油菜菌核病SclerotiniaStemRotofOilseed由病原物Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary引起的油菜真菌病害。4.病原物4.1病原物来源在安徽省油菜产区的不同生态区采集的油菜菌核病病株或菌核，经分离

4、、纯化、鉴定后，分别按生态区建立菌种库。4.2接种体组成接种体一般为江淮丘陵区、沿江生态区等生态区内的油菜菌核病病菌混合接种体，或特定生态区的油菜菌核病病菌接种体。也可以根据委托单位要求从菌种库中制备。没有特定要求的情况下，接种体为菌种库中最新的病原物。4.3病原物分离对采集病株上的菌核进行单菌核分离。操作方法：将表面消毒后的菌核切成薄块,用1%NaClO消毒5min，直接放入PDA平板上，25℃条件下培养，分离物经形态学鉴定确认为Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary后，进行菌株纯化。通过油菜幼苗期致病性测定，筛选强致病力菌株

5、，扩繁冷冻保存备用。抗病性鉴定接种所用的分离物应为当地致病力强的菌种。所用菌株需定期进行致病力测定（隔年）。4.4病原物接种体制备4.4.1油菜菌核病菌接种体制备接种所用分离物应为当地致病力强的分离物。叶片接种鉴定的接种体为菌碟，茎杆接种鉴定的接种体为带菌牙签。4.4.2菌碟接种体制备冷冻保存的菌核病菌菌丝活化后接种到PDA平板上，25℃条件下培养3天～4天，使菌落长至平板的3/4时沿菌落边缘打孔制成直径6mm左右的菌碟备用。4.4.3带菌牙签接种体制备-4-PSJG1107.1-2009先将木制牙签截至30mm在沸水中煮沸15min，捡出放入马铃薯蔗糖培养液

6、中，高压灭菌锅灭菌20min后，呈放射状排列于培养皿中，中心接菌核病菌的菌丝块。25℃条件下培养6天，使牙签上长满菌丝备用。5鉴定圃5.1鉴定圃选择田间鉴定圃应设置在油菜菌核病人工营造抗性鉴定圃或病害适发区，选择具备良好的发病环境和灌溉条件（安装人工雾化系统）、地势平坦、土壤肥沃的地块。鉴定圃内不施用任何杀菌剂。每年在鉴定圃内均匀施一定量菌核，以保证试验地含丰富、分布均匀的菌核。5.2鉴定圃种植适期播种，播种时间与大田生产一致或适当调整播期以使植株接种期和发病期能够与适宜的气候条件（湿度与温度）相遇。（小区行长1.5m，株距0.3m，行宽0.5m），施肥水平与

7、大田生产相当,追实苗肥5kg尿素/亩，越冬前7.5kg尿素/亩。苔期不中耕培土，不摘除老黄叶。花期不施用杀菌剂。每品种重复2次，每50份～100份鉴定品种设1组抗病（中双9号）和中度感病（中油821）对照品种，品种间采用随机排列。5.3鉴定圃管理在油菜初花至终花期喷雾，每天从早上7点到晚上10点，视天气状况进行多次喷雾保湿，以满足发病条件。6.鉴定6.1人工接种6.1.1叶片接种鉴定叶片接种于油菜初花期进行。用打孔器（直径为0.6cm），沿PDA平板上菌丝生长边缘取菌丝块，菌丝面朝下接种于每株中部叶片的中部，每个品种20张叶片。菌丝块上面加脱脂棉保湿。接种后温

8、度要求20ºC～25ºC，雾化保湿，湿