pbs缓冲液的配制方法

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时间:2018-07-28

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1、PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。pH--A液(ml)--B液(ml)5.60--9.50--0.255.91--9.00--1.006.24--8.00--2.006.4

2、7--7.00--3.006.64--6.00--4.006.81--5.00--5.006.98--4.00--6.007.17--3.00--7.007.38--2.00--8.007.73--1.00--9.008.04--0.50--9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取Na

3、Cl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结: 母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2

4、mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :pH       0.2M NaH2PO4(m

5、l)   0.2M Na2HPO4(ml)5.7             93.5                          6.55.8             92                             8            5.9             90                             106.0             87.7                          12.36.1             85                             156.2             81.

6、5                          18.56.3             77.5                          22.56.4             73.5                          26.56.5             68.5                          31.56.6             62.5                          37.56.7             56.5                          43.56.8             

7、51                            496.9              45                           557.0              38                           627.1              33                           677.2             28                        

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