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时间:2017-11-08
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1、PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。pH--A液(ml)--B液(ml)5.60--9.50--0.255.91--9.00-
2、-1.006.24--8.00--2.006.47--7.00--3.006.64--6.00--4.006.81--5.00--5.006.98--4.00--6.007.17--3.00--7.007.38--2.00--8.007.73--1.00--9.008.04--0.50--9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏
3、水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结: 母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度P
4、B(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml
5、即可。 若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90
6、106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5
7、 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627
8、.1 33 677.2 28
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