hiv初筛实验室工作制度及操作规范

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1、HIV快速检测实验室操作规范及工作制度一、抽血标准操作规程    1、适用范围    需做血液检测的对象。  2 、试剂与材料  碘酒、酒精棉、棉签、橡皮止血带、注射器（一次性采血器）、试管、止血棉。  3 、操作步骤  3.1核对被检者姓名并标价试管；  3.2请被检者入座，伸出手臂放在采血垫上；  3.3用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头；  3.4选择静脉，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭（直径约6cm左右）消毒；  3.5用酒精棉脱碘；  3.6把一次性注射器（一次性采血器）打开，在采血部位穿刺静脉，抽取血液； 3.7放松橡皮止血带，拔出针头，同时请被检者

2、用止血棉压迫止血。      二、酒精棉球的制备1.试剂与材料    无水乙醇（分析纯）、  消毒蒸馏水若干、消毒量筒（1000ml）、消毒盛器 2.操作步骤 2.1把消毒棉放入消毒盛器中待用。 2.2取165ml消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中，再加入一瓶500ml无水乙醇充分 混匀。2.3把配好的75％酒精到入放有消毒棉的盛器中    17                                                        三、样品的采集和处理            1.  范围      本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、

3、浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。2.  操作步骤2.1  样品的采集和处理    艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下：2.1.1血清样品采集和处理2.1.1.1用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置1~2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血请备用。2.1.1.2如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤，迅速把

4、滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。2.1.2  抗凝血样品采集和处理2.1.2.1用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽去静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。2.1.2.2应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或柠檬酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。172.1.2.3用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆，否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。(病毒载量测定不同方法

5、对样品的要求见第四章4.1中表2；CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。)2.1.3采集样品注意事项2.1.3.1采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒有特殊要求）。2.1.3.2采集样品时应注意安全，建议采用真空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作，应带双层手套。2.2  样品的保存2.2.1用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8度。2.2.2用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20以下，进行病毒RNA检

6、测的样品如需保存3个月以上应置于-80度。2.2.3用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不可检测。2.3  样品的运送2.3.1  实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。2.3.2应采用WHO提出的三级包装系统2.3.2.1第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。2.3.2.2第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器

7、，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。2.3.2.3第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。2.3.3  17血清和血浆样品应在2~8度条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下18~23度运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。2.3.4  运送感染性材料必须有记录。2.3.5  如分离血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20度以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。2.3.6  特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必

8、须按三级包装系统将盛样品