bhk21法制人用狂犬疫苗

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1、摘要狂犬疫苗是一个历史悠久的疫苗，是嗜神经性病毒引起的人兽共患的传染病。法国科学家巴斯德于1885年发明。我国现在制造的狂犬疫苗系用狂犬病毒固定毒接种于原代地鼠肾细胞，培养后，收获毒液，经浓缩、纯化、精制并面检定合格后即为预防狂犬病的疫苗。狂犬疫苗的推广应用大大降低了人间狂犬病的发病率。到目前为止，世界上还未有一种有效的治疗狂犬病的方法，发病后的死亡率几乎100%。所以，凡被病兽或带毒动物咬伤或抓伤后，都应立即注射狂犬病疫苗。精制地鼠肾细胞狂犬疫苗生产中,地鼠肾细胞在组织培养中的生长状况对狂犬病病毒的培养起着决定性作用,而细胞生长的质量和新生小牛血清对肾细胞的保护与

2、促进生长作用有至关重要的关系。关键词： 毒种疫苗制造细胞瓶牛血清17引言31．试剂与仪器31.1毒种制备所需31.2疫苗制备所需41.3培养瓶对细胞的影响41.4牛血清对细胞的影响42.毒种42.1毒种来源42.2毒种传代52.2.1毒种悬液制备52.2.3接种52.2.4取脑53．疫苗制备63.1操作人员的消毒准备63.2地鼠制备63.2.1地鼠皮毛消毒63.3种毒洗换73.3.1洗液73.4无菌实验83.5取毒力84．影响因素94.1培养瓶对地鼠肾细胞的影响94.1.2方法94.1.3细胞生长情况,一般在光镜下分成四级94.1.4浓缩9174.1.5检定94.2

3、牛血清对细胞的影响104.2.1地鼠肾细胞悬液和病毒液的制备104.2.2细胞生长情况的判定标准105．实验结果115.1疫苗制备115.2细胞瓶对肾细胞的影响115.2.1细胞生长情况比较115.3牛血清对肾细胞的影响136．结语及展望15致谢16参考文献1717引言目前，养宠物的家庭越来越多，不少喜爱宠物的人都有被爱犬或爱猫等小动物多次咬伤的经历，因此，他们关心已接种过狂犬病疫苗又被狗等小动物咬伤后，是否还需要再接种狂犬病疫苗？据统计，在我国95％以上的人狂犬病是由犬狂犬病传染所致。狂犬病是凶险的疾病，人一旦感染上几乎百分之百死亡。因此被犬致伤后要及时去医院处理

4、伤口，并去当地卫生防疫站注射狂犬病疫苗。预防狂犬病惟一有效的措施是接种狂犬病疫苗。轻度被犬咬伤者需接种狂犬病疫苗5针（全程免疫）；如在一年内再次被犬咬伤，还需加强注射狂犬病疫苗1针；如全程免疫一年后再次被犬咬伤应该加强注射2～3针。咬伤严重或特殊情况下，则应由防疫站医生根据情况酌情处理。　狂犬病是由嗜神经性的狂犬病病毒引起的一种人畜共患烈性传染病，世界范围流行，其发病和死亡率居我国甲、乙类传染病之首。目前狂犬病治疗全世界无特效药，一旦发病其死亡率为100%，及时进行狂犬病疫苗接种为预防、控制和消除狂犬病唯一有效的保护性措施，因而生产出安全高效的狂犬病疫苗尤为重要，而

5、筛选出优良的生产用病毒株是制造疫苗的关键。我国现在制造的狂犬疫苗系用狂犬病毒固定毒接种于原代地鼠肾细胞，培养后，收获毒液，经浓缩、纯化、精制并检定合格后即为预防狂犬病的疫苗。1．试剂与仪器1.1毒种制备所需2%灭活小件血清注射用水离心沉淀器一台乳钵，平皿玻璃沙吸管（1ml10ml），1ml注射器，中试管，镊子，弯剪，50ml沉淀离心瓶，乳胶手套分装豚鼠脑毒种用的250ml血浆瓶等装铝箱送高压125Pa，温度121灭菌备用171.2疫苗制备所需汉克氏液牛血清199培养液人血白蛋白7.5%NaHCO3甲醛柳硫汞胰酶15升瓶 5升瓶100毫升三角瓶三角虹吸装置，眼科剪刀若

6、干，眼科镊子，外科钝头剪刀，橡胶塞，烧杯，三角烧瓶带玻璃珠纱布条鸡玚带，不锈钢漏勺，以上器材装铝箱送高压灭菌.另外还准备3瓶用棉赛包布包好扎好送高压125帕121度灭菌一小时备用，此外还准备地鼠板1.3培养瓶对细胞的影响.地鼠12～14日龄（卫生部长春生物制品研究所实验动物室提供）小白鼠昆明种体重11～13g(中国医科大学实验动物部提供)3.细胞培养瓶3L和10L(成都市万福玻璃仪器厂出品)转瓶机3L和10L转瓶机(均为辽宁省医疗器械研究所生产)狂犬病固定毒aG株(疫苗株)和CVS株(攻击株)(均为中国药品生物制品检定所提供)1.4牛血清对细胞的影响新生小牛血清(沈

7、阳安迪生物高科技公司提供)浓度为8%;0.25%水解乳蛋HanKs生长液;0.4%人血蛋白HanKs-SML维持液;12～14d龄地鼠肾细胞,实验组和对照组解剖取肾,均经胰酶消化过夜,分散备用;狂犬病毒毒种(中国药品生物制品检定所提供),狂犬病固定毒“北京株”(aG株);小白鼠昆明种(购于中国医科大学实验动物室),体重11～13g。2.毒种2.1毒种来源aG株，由中国药品生物检定所委托卫生部制品研究所分发,生产用毒种不超过aG5代。172.2毒种传代2.2.1毒种悬液制备 感染豚鼠（120g-180g）用的病毒悬液在无菌操作室内制备，已合格存放于—40度冰冻保存