药物的镇痛作用(实验2)

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1、药物的镇痛作用目的与要求1.学习常用的三种疼痛实验模型的制作。2.观察哌替啶的镇痛作用。实验原理疼痛是临床的常见症状，疼痛除了由于伤害性刺激所引起的情绪反应外，往往还表现出自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等。痛觉不仅具有较大的个体差异，而且同一个体在不同条件下的痛觉也不同。痛觉的观察指标容易受主观因素的影响，目前常用一种衡量痛觉敏感性的指标即痛觉阈值（简称痛阈值）客观地对痛觉做出描述。解热镇痛药、镇痛药及麻醉药等是目前临床上常用的具有镇痛作用的药物，可通过提高痛觉阈值达到镇痛的目的。疼痛实验模型的制作，常用的方法有：热刺

2、激、化学刺激、机械刺激及电刺激等一、热板法实验材料一.实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二．器材与药品Woolfe热板、天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。实验方法1.筛选实验动物将热板温度调节至（55±0.5）℃，置小鼠与热板上，测定各小鼠的正常痛反应（舔后足或抬后足并回头）时间，共2次，每次间隔5min，该时间即为小鼠的痛阈值，以平均值不超过30s为合格，共选出6只小鼠供实验用。2.动物分组及给药取选出的6只小鼠，随机分为3组，即实验组1、实验

3、组2和对照组（每组2只），称重编号。按上述方法分别测定小鼠给药前的痛阈值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注视3%安乃近300mg/10g（0.1ml/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。于注射后15min、30min、45min分别再次测定实验组和对照组各小鼠痛阈值。对60s不舔后足、不抬后足并回头的小鼠，痛阈值按60s计算。3.结果计算收集整个实验室结果，按下列公式计算不同时间的痛阈改变百分率。痛阈改变百分率=4.5将小鼠给药前、后的痛阈值记入表13-4。并计算各时间点

4、的痛阈改变百分率。以时间为横坐标、痛阈改变百分率为纵坐标，绘出用药后15min、30min、45min小鼠的痛阈改变百分率时效曲线（图13-2）。表13-4盐酸哌替啶、安乃近对小鼠痛阈值的影响动物数给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（s）15min30min45min实验组1实验组2对照组图13-2痛阈改变百分率时效曲线注意事项1.热板法要求必须用雌性小鼠。因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易于热板接触而影响实验结果。2.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。以痛阈值在30s以内为敏感鼠，供实验用。3.用药后小鼠痛阈值超过60d者应立即取出，以防烫

5、伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s计算。一、化学刺激法实验材料一、实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二、器材与药品5天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。实验方法1.取体重相近的小鼠6只，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重，并观察各组小鼠的活动情况。2.实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注射3%安乃近300mg/10g（0.1m

6、l/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。3.给药后20min，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g（或1%酒石酸锑钾溶液0.1ml/10g），观察15min内各组出现扭体反应（腹部收缩内凹、躯干后肢伸张、臀部高起）的动物数。4.结果计算收集整个实验室结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率。药物镇痛百分率=表13-5盐酸哌替啶、安乃近对小鼠化学刺激致扭体反应的影响动物数扭体反应数无扭体反应数实验组1实验组2对照组注意事项1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配置。存放过久，将导致作用明显减弱。2

7、.哌替啶给药剂量要准确。剂量过大抑制呼吸，剂量过小不发挥作用，均会影响实验结果。三、甩尾法实验材料一、实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二、器材与药品热辐射刺激仪、天平、鼠笼、小鼠固定器、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。5实验方法1、筛选实验动物将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，打开灯光，光束直射于鼠尾1/3处，观察小鼠甩尾动作，记录出现甩尾动作的时间作为小鼠痛阈值。选出6只在6s内出现甩尾动作的小鼠供实验用。超出6s的

8、小鼠应弃除。2.动物分组及给药取选出的6只小鼠，随机分为3组即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重编号。将小鼠装入笼中，暴露并抓住鼠尾，按上述方法测定小鼠给药前的痛阈值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg