药物的镇痛作用(实验2)

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1、药物的镇痛作用目的与要求1.学习常用的三种疼痛实验模型的制作。2.观察哌替啶的镇痛作用。实验原理疼痛是临床的常见症状，疼痛除了由于伤害性刺激所引起的情绪反应外，往往还表现出自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等。痛觉不仅具有较大的个体差异，而且同一个体在不同条件下的痛觉也不同。痛觉的观察指标容易受主观因素的影响，目前常用一种衡量痛觉敏感性的指标即痛觉阈值（简称痛阈值）客观地对痛觉做出描述。解热镇痛药、镇痛药及麻醉药等是目前临床上常用的具有镇痛作用的药物，可通过提高痛觉阈值达到镇痛的目的。疼痛实验模型的制作，

2、常用的方法有：热刺激、化学刺激、机械刺激及电刺激等一、热板法实验材料一.实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二．器材与药品Woolfe热板、天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。实验方法1.筛选实验动物将热板温度调节至（55±0.5）℃，置小鼠与热板上，测定各小鼠的正常痛反应（舔后足或抬后足并回头）时间，共2次，每次间隔5min，该时间即为小鼠的痛阈值，以平均值不超过30s为合格，共选出6只小鼠供实验用。2.动物分组及给药取选出的6只

3、小鼠，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重编号。按上述方法分别测定小鼠给药前的痛阈值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注视3%安乃近300mg/10g（0.1ml/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。于注射后15min、30min、45min分别再次测定实验组和对照组各小鼠痛阈值。对60s不舔后足、不抬后足并回头的小鼠，痛阈值按60s计算。3.结果计算收集整个实验室结果，按下列公式计算不同时间的痛阈改变百分率。痛阈改变百分率=4.5

4、将小鼠给药前、后的痛阈值记入表13-4。并计算各时间点的痛阈改变百分率。以时间为横坐标、痛阈改变百分率为纵坐标，绘出用药后15min、30min、45min小鼠的痛阈改变百分率时效曲线（图13-2）。表13-4盐酸哌替啶、安乃近对小鼠痛阈值的影响动物数给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（s）15min30min45min实验组1实验组2对照组图13-2痛阈改变百分率时效曲线注意事项1.热板法要求必须用雌性小鼠。因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易于热板接触而影响实验结果。2.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。以痛阈值在30s以

5、内为敏感鼠，供实验用。3.用药后小鼠痛阈值超过60d者应立即取出，以防烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s计算。一、化学刺激法实验材料一、实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二、器材与药品5天平、鼠笼、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。实验方法1.取体重相近的小鼠6只，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重，并观察各组小鼠的活动情况。2.实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg

6、/10g（0.1ml/10g），实验组2小鼠腹腔注射3%安乃近300mg/10g（0.1ml/10g），对照组腹腔注射等容量生理盐水。3.给药后20min，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g（或1%酒石酸锑钾溶液0.1ml/10g），观察15min内各组出现扭体反应（腹部收缩内凹、躯干后肢伸张、臀部高起）的动物数。4.结果计算收集整个实验室结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率。药物镇痛百分率=表13-5盐酸哌替啶、安乃近对小鼠化学刺激致扭体反应的影响动物数扭体反应数

7、无扭体反应数实验组1实验组2对照组注意事项1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配置。存放过久，将导致作用明显减弱。2.哌替啶给药剂量要准确。剂量过大抑制呼吸，剂量过小不发挥作用，均会影响实验结果。三、甩尾法实验材料一、实验动物雌性小鼠（18～22g）6～7只。二、器材与药品热辐射刺激仪、天平、鼠笼、小鼠固定器、注射器（1ml）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。5实验方法1、筛选实验动物将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，打开灯光，光束直射

8、于鼠尾1/3处，观察小鼠甩尾动作，记录出现甩尾动作的时间作为小鼠痛阈值。选出6只在6s内出现甩尾动作的小鼠供实验用。超出6s的小鼠应弃除。2.动物分组及给药取选出的6只小鼠，随机分为3组即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重编号。将小鼠装入笼中，暴露并抓住鼠尾，按上述方法测定小鼠给药前的痛阈值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg